2018 Fiscal Year Annual Research Report
Characteristics of induced pluripotent stem cells from clinically divergent female monozygotic twins with Danon disease.
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16K19632
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| Research Institution | Kanazawa University |
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Principal Investigator |
吉田 昌平 金沢大学, 附属病院, 助教 (30623657)
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2016-04-01 – 2019-03-31
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| Keywords | ダノン病 / iPS細胞 / X染色体不活性化 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
既に作成した女性ダノン病患者Tリンパ球より樹立したiPS細胞より、正常LAMP2mRNAを発現するクローン(WT)、異常LAMP2mRNAを発現するクローン(MT)のクローニ ングを行い、心筋分化させた。分化心筋に対するLAMP2の免疫染色ではWTから作成した分化心筋(WT-iPSC-CMs)に対してはLAMP2の染色が認められ たが、MTから作成した分化心筋(MT-iPSC-CMs)に対してはLAMP2蛋白の発現が認められなかった。光学顕微鏡での観察においては特に差異を認めなかったが、 透過電子顕微鏡での観察においてMT-iPSC-CMsではその心筋細胞内に自己貪食空胞の存在が確認された。また、バキュ ロウイルスを用いたtandem fluorescent LC3 assayを行い、MT-iPSC-CMsにおいてはファゴソームにライソソームが結合し、オートライソソームとなる過程での 成熟不全が認められることを確認した。更にLC3に対するwestern blotでは、通常状態でのLC3-II分画の増加がMT-iPSC-CMsにおいては認められており、相対的に プロテアーゼインヒビタ ーを使用しても、LC3-II分画の増加が認められないことを確認した。以上の差異について、ヒトアンドロゲンレセプター抗体のCAGリピートを用い、X染色体の不活化の差異が反映されているということを証明し、本研究はJ Mol Cell Cardiol. 2018 Jan;114:234-242. doi: 10.1016/j.yjmcc.2017.11.019.に発表した。また、ヨーロッパ心臓病学会においても、X染色体の不活性化によるiPS細胞の際について発表を行った。
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[Journal Article] Characteristics of induced pluripotent stem cells from clinically divergent female monozygotic twins with Danon disease.2018
Author(s)
Yoshida S, Nakanishi C, Okada H, Mori M, Yokawa J, Yoshimuta T, Ohta K, Konno T, Fujino N, Kawashiri MA, Yachie A, Yamagishi M, Hayashi K.
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Journal Title
Journal of Molecular and Cellular Cardiology
Volume: 114
Pages: 234-242
DOI
Peer Reviewed
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