2016 Fiscal Year Research-status Report
出生後FOXP3のエピジェネティクス変化と免疫寛容の関係に関する解析
Project/Area Number |
16K19667
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Research Institution | Juntendo University |
Principal Investigator |
山崎 晋 順天堂大学, 医学部, 助教 (80771774)
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Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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Keywords | アレルギー / 免疫学 / エピジェネティクス / 制御性T細胞 |
Outline of Annual Research Achievements |
本研究はアレルギー疾患の病態に関わる、免疫寛容に重要な制御性T細胞(Treg)についての出生後のエピジェネティクスな変化とそれに関わる処因子を捉えることを目的としている。Tregは新生児期に急激にその数を増やし、生後数日で成人と同等数まで増加することが報告されている。本研究では臍帯血と日齢4の血液検体で、Tregの発現に重要なFOXP3の比較をメチル化を利用したエピジェネティクス解析を行うという手法で本研究の目的を遂行しようとしている。 H.28年度は遺伝倫理委員会の承諾を得た上で、検体採集(臍帯血と日齢4の血液)を開始し、パイロットスタディとして5検者(計10検体)についてFOXP3領域の一部200bpについてのバイサルファイトシーケンス法によるメチル化解析と、それに伴う血中酪酸値(HDAC阻害作用)、血清中のHDAC阻害作用の解析を行った。 結果として、現時点では酪酸については予想されていた有意な変化を捉えられたが、メチル化解析、またHDAC阻害作用の解析については有意な結果は現時点では得られていない。しかし、新生児期の特徴的な酪酸値の変動が明らかではあるため、酪酸と遺伝子発現について今後の研究の方向性を修正していく。 H.29年度はFOXP3の解析箇所の変更をするか、または高額な解析費用を要するためメチル化解析ではなくrPCRによる代用も検討しながら検体採集と合わせて進行させていく。
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Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
倫理委員会と検体の解析方法の確立については滞りなく進行できた。 ただし、対象検体患者を正常新生児(母体既往歴なし、母体への抗菌薬投与なし)としたため、大学病院の特性上正常分娩数が少なく検体採集目標30例中、現在12例までとなっており想定内ではあるが若干の遅れがある。しかし、本年度中には検体採集は可能と考えている。 また、メチル化の解析箇所に有意差を認めなかったため当初より、進行度としてやや遅れていると判断した。
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Strategy for Future Research Activity |
正常新生児検体を集めていく。 また、エピジェネティクス解析領域について、別の遺伝子箇所に変更するか検討。ただし、高額の解析費をようするためエピジェネティクス変化に関わる酪酸のHDAC阻害作用に重点を置いた研究とし他の遺伝子を含めたreal-time PCRによる解析で遺伝子発現をしたとし代用することも検討する。
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Causes of Carryover |
1年度中に解析に出せた検体数が想定より少なかったため。
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Expenditure Plan for Carryover Budget |
1検体の解析にかかる金額は想定よりも高額であり、1年度余剰金については次年度の検体解析費に使用する予定である。
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