Functional analysis of deubiquitinating enzyme in bile cancer using zenograft model

2018 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 16K19912
• Research Institution: Tohoku University
• Principal Investigator: 石田 晶玄 東北大学, 大学病院, 助教 (90619660)
• Project Period (FY): 2016-04-01 – 2019-03-31
• Keywords: 胆嚢癌 / BAP１ / 遺伝子変異

Outline of Annual Research Achievements

当施設で摘出手術を施行した、胆嚢癌44例においてゲノムDNAを抽出した。ゲノムにおいて、クロマチンリモデリング遺伝子複合体であり、近年胆道癌においてその遺伝子変異が注目されている、BAP1の遺伝子の変異について、サンガーシークエンスにより、全エクソンを対照に検索を行った。胆嚢癌症例において、BAP1遺伝子の変異が高頻度に認めることを明らかにした。またホモ欠失と思われる変化も多く認めた。
以上より、胆嚢癌においてBAP1遺伝子変異が多いことを示し、その頻度は、次世代シークエンサーを持ちいた海外の報告よりも高いことが明らかとなった。
BAP1の臨床標本においても、タンパク質レベルの遺伝子発現を検討するため、全例免疫染色を行ない、また生命予後との比較を行なった。タンパク質におけるBAP１発現と、遺伝子変異は相関しており、遺伝子変異が発現低下の主な原因であると推測された。生命予後に関しては、BAP1発現が低下している症例において有意に予後が不良であった。胆嚢癌のBAP1発現低下および遺伝子変異が、予後不良因子となっていることは、本研究が初めての報告となる。
基礎実験では、BAP1の発現低下したモデルを胆嚢癌細胞株で作成した。BAP1の発現低下は、癌細胞の増殖能には直接影響しないが、浸潤能・遊走能を亢進させ、癌の悪性度を増悪させていることを明らかとした。
臨床検体より胆道癌細胞の初代培養を施行し、現在まで３株樹立している。1例は浸潤能が著明に亢進している。網羅的な遺伝子解析を施行した。

Research Products

• [Journal Article] Loss of BAP1 expression is associated with genetic mutation and can predict outcomes in gallbladder cancer. (2018)
  • Author(s): Hirosawa T1, Ishida M1, Ishii K1, Kanehara K1, Kudo K1, Ohnuma S1, Kamei T1, Motoi F1, Naitoh T1, Selaru FM2, Unno M1.
  • Journal Title: PLoS One. Volume: 13 Pages: 0206643
  • DOI: 10.1371
  • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research