2017 Fiscal Year Annual Research Report
Development new therapy for resected pancreatic cancer focused on Dclk1
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16K19932
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| Research Institution | Yamaguchi University |
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Principal Investigator |
竹本 圭宏 山口大学, 医学部附属病院, 助教 (50622213)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | Dclk1 / MEK / 膵癌 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
Dclk1は大腸癌の癌幹細胞マーカーとして報告されたが、膵癌の前癌病変である PanINの増殖にも関与するリン酸化蛋白である。
2016年度は、膵癌細胞株を用いてGemcitabineにDclk1阻害薬であるLRRK2-IN-1を併用した効果をCell proliferation assay、Western Blot（WB）、Flow cytometry（FC）などで評価した。Gemcitabine単剤に比べ、Dclk1阻害薬を併用すると細胞生存率は有意に低下した。その機序として細胞周期に関与するChk1のリン酸化（pChk1）に注目した。WBではGemcitabineによりpChk1の発現は亢進し、Dclk1阻害薬を併用するとpChk1の発現は抑制された。FCでは、GemcitabineによりDNA損傷を生じた細胞（H2AX陽性細胞）がpChk1の上昇により細胞周期が停止し、S期に留められていた。Dclk1阻害薬を併用すると DNA損傷を受けた細胞は、修復されることなく細胞周期が進行し、細胞死が引き起こされることが明らかとなった。以上よりGemcitabineにDclk1阻害薬を併用することにより、膵癌細胞の増殖抑制効果が増強した。
2017年度は当科の膵癌手術症例においてDclk1の発現が予後に相関するか否かを検討した。臨床検体は2005年4月～2017年12月までに当科で膵癌に対して手術を行った35症例を対象とした。Dclk1・Ki67・pMEKの発現は免疫染色を行い、Histoscoreを用いて定量化した。中央値をcut-off値としてDclk1高値群（n=18）、Dclk1低値群（n=17）に分けた。患者背景や手術因子では両群間に有意差はなかった。予後に関しては、RFSは有意差がなかったが、OSはDclk1高値群が有意に不良だった。多変量解析を行うとDclk1発現と術後合併症が独立した予後不良因子となった。Dclk1が癌増殖に与える影響をみるためにpMEKとKi67の発現を評価したが、Dclk1高値群ではpMEKおよびKi67の発現が高値だった。以上より、膵癌手術症例においてDclk1は癌の増殖を介して予後不良因子となりうる可能性があると思われた。
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