2016 Fiscal Year Research-status Report
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16K20055
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| Research Institution | Okayama University |
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Principal Investigator |
堀田 昌宏 岡山大学, 大学病院, 医員 (00708084)
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2016-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | 軟骨分化 / 骨棘形成 / ADAM12 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
ヒト変形性関節症の関節軟骨組織でTGF-βにより誘導されるADAM12が高発現し、軟骨細胞の増殖促進やクラスター形成に関与することが報告されている。本研究ではADAM12の骨棘形成への関与について検討した。人工関節全置換術時に採取したヒト骨棘組織において増殖軟骨細胞層と肥大軟骨細胞層でADAM12の発現を認めた。ATDC5細胞にITSを添加した軟骨分化過程において、Adam12の発現がピークに達した後に軟骨細胞の肥大化期のマーカー遺伝子であるCol10a1の発現を認めた。CRISPR/Cas9 systemを用いて作成したAdam12-KO ATDC5細胞の分化誘導過程ではwild typeと比較し、分化誘導後4週目におけるCol10a1のmRNAの発現が抑制され、分化誘導後5週目でのCol10a1の蛋白の発現も抑制された。TGF-β刺激によりAdam12とIgf-1、Runx2の発現が亢進し、Adam12をKOすることでIgf-1とRunx2の発現が抑制された。さらに、Adam12過剰発現ベクターをATDC5細胞にtransfectionすることで、Igf-1やRunx2の発現が亢進した。ADAM12は骨棘組織に発現し、IGF-1やRUNX2、X型コラーゲンの発現を制御することで、骨棘形成に関与していることが示唆された。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
In vitroの研究はおおむね順調に進んでいる。動物実験については継続中である。
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| Strategy for Future Research Activity |
CRISPR-Cas9 systemを用いたADAM12-KOマウスの作成に難渋しているため、相同組み換えによる既存のADAM12-KOマウスの受精卵を用いて、動物実験を進める予定である。
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