2018 Fiscal Year Annual Research Report
Establishment of a minimally invasive diagnostic method using induced pluripotent stem cells
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16K20098
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| Research Institution | Hiroshima University |
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Principal Investigator |
近藤 隆志 広島大学, 病院(医), 助教 (20711774)
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2016-04-01 – 2019-03-31
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| Keywords | 悪性高熱症 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
悪性高熱症の診断には、機能検査として筋生検によるCa-induced Ca release（CICR）検査などが必要であるが、特に小児患者においては筋生検が侵襲的検査であることが問題である。本研究は、血液もしくは皮膚から人工多能性幹細胞（iPS細胞）を作成した後、iPS細胞から作成した筋組織を用いて機能検査を行うことによって、悪性高熱症の低侵襲的診断法を確立することを目的とした。
まず血液からのiPS細胞を試みたが細胞の作製が困難であったため、使用する材料を線維芽細胞に変更して、線維芽細胞からのiPS細胞作成を試みるとともに、線維芽細胞に直接骨格筋細胞への分化誘導を促す転写因子を組み込んだ遺伝子発現ベクターを導入することにより、線維芽細胞を筋芽細胞に分化させて骨格筋細胞を作成する代替実験を行った。また、機能検査と並行して計画していた遺伝子情報解析の一環として、対象となるCICR検査を行われた患者から新たに同定された遺伝子変異に対して、human embryonic kidney細胞（HEK細胞）を用いた機能解析を行った。
線維芽細胞からのiPS細胞作成は血液からの作成と同様に困難であり、研究期間中に確立するには至らなかった。代替実験としての線維芽細胞から筋芽細胞への転換を経た筋管細胞作成は可能となったが、筋管細胞の安定した培養および機能解析を安定して行える状況には至らなかった。一方、HEK細胞による機能解析の結果からは、今回解析した遺伝子変異が悪性高熱症の発症原因の一つである1型リアノジン受容体の機能異常をきたすことが示されたため、その成果について論文発表を行った。
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