2016 Fiscal Year Research-status Report
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16K20147
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| Research Institution | Sapporo Medical University |
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Principal Investigator |
京田 有樹 札幌医科大学, 医学部, 研究員 (90718024)
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2018-03-31
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| Keywords | 前立腺肥大症 / 神経内分泌細胞 / レプチン |
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| Outline of Annual Research Achievements |
ヒト前立腺標本を用いて移行領域内のNE細胞の分布を検討したDistribution of Neuroendocrine Cells in the Transition Zone of the Prostate.がAdv Urol. 2017;2017:8541697.に掲載された。また、前立腺肥大症モデルラットも用いた検討についても近日中に論文投稿予定である。
実際の研究内容としては、NE上清を添加して培養したヒト前立腺上皮細胞(PrEC)・ヒト前立腺間質細胞(PrSC)の遺伝子と、それぞれNE上清を添加しないで培養した細胞の遺伝子を3D-Gene発現解析で精査した。得られた結果を比較すると、NE上清を添加したPrECでLEPのmRNA発現が、NE上清を添加したPrSCではMC3RのmRNA発現が亢進していたため、それぞれのprobeを用いてRT-PCRを施行したところ、発現の上昇が確認できた。
次にNE上清内からLEP,MC3Rに関連するNE因子を調査するために、NE上清を用いてELISA法、ウエスタンブロッド法を行ったところ、Neuropeptide Y (NPY)が関連している事が確認できた。
更に、リコンビナントNPYをPrECに添加することでPrEC内においてLEPのmRNA発現が濃度依存的に上昇することが確認できた。しかし、NPYをPrSCに添加してもMC3Rの発現上昇は認められなかった。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
当初予定していたPrECからLEP、PrSCからMC3Rをノックダウンすることも考えていたが、PrSCに関する実験が進まなかったこともあり、施行できなかったがそれ以外は計画通り順調に進んだと思われる。
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| Strategy for Future Research Activity |
PrSCに関してはMC3R以外のprobeを用いることも検討中であり、そちらを進めていく。ノックダウンの実験と、当初予定していたNEアログラフトに関する実験は時間の都合上、断念せざるを得ない状況である。
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| Causes of Carryover |
研究成果を発表するためのオープンアクセス料を平成28年度内（3月）に支払い予定であったが、平成29年度の支払いとなったため。
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| Expenditure Plan for Carryover Budget |
研究に必要な物品の購入、成果の学会発表・論文発表の経費として使用する。
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