新規頭頸部がん幹細胞マーカーCSPG4の解析と治療戦略への応用

2016 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 16K20288
• Research Institution: Miyagi Prefectural Hospital Organization Miyagi Cancer Center
• Principal Investigator: 泉山 慶子 地方独立行政法人宮城県立病院機構宮城県立がんセンター(研究所), がん先進治療開発研究部, 共同研究員 (60774031)
• Project Period (FY): 2016-04-01 – 2018-03-31
• Keywords: 頭頸部外科学 / 癌幹細胞

Outline of Annual Research Achievements

本課題では、頭頸部がんのがん幹細胞(CSC)マーカーとして申請者が同定したCSPG4に着目し、「頭頸部がん幹細胞」における機能解析と臨床応用に取り組む。具体的には、①頭頸部がん「がん幹細胞」の機能発現におけるCSPG4細胞内ドメインの果たす役割は何か？、②がん幹細胞性の発揮に関わるエフェクター分子および複合体は何か？③CSPG4の活性化するパスウェイおよび標的遺伝子は何か？、④CSPG4を標的とした特異的治療法の開発は可能か？の４点を検討する。これらのアプローチによりCSPG4陽性のがん幹細胞に関する研究を展開し、頭頸部がん幹細胞の新たな標的を探索する。頭頸部がんの革新的治療に資する基盤となるデータ収集を目的とする。
本年度はCSPG4発現レトロウイルスベクターの構築を行い、頭頸部がん細胞株HPCM2に安定にインテグレートさせた細胞を樹立した。細胞については、これまでのところ通常培養では著明な変化はない。そこで、幹細胞性のアッセイ等を行うことでCSPG4の機能をさらに確認する予定である。さらに、CSPG4のshRNAを遺伝子導入するためのCSPG4ノックダウンレンチウイルスベクターの構築を行った。さらにCRISPR/Cas9法を用いてCSPG4ノックアウト細胞株を樹立するため、使用するプラスミドの構築を行った。これらの細胞が示す「がん幹細胞性」について解析する。一方、特異抗体の作成について準備を進めている。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

順調であり特段の研究計画の変更はない

Strategy for Future Research Activity

CSPG4遺伝子発現を上昇または低下させた細胞について、計画通り解析を施行する。

Causes of Carryover

実験遂行状況により、当初予定の消耗品費、旅費、人件費等を次年度使用することとなったため

Expenditure Plan for Carryover Budget

次年度に使用することで当初計画を満了する予定としている