2017 Fiscal Year Annual Research Report
The effect of a carbon dioxide laser on wound healing for intractable skin ulcer
Project/Area Number |
16K20369
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Research Institution | Juntendo University |
Principal Investigator |
上森 友樹 順天堂大学, 医学部, 助手 (70773836)
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Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2018-03-31
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Keywords | 炭酸ガスレーザー / 低出力照射治療 / 線維芽細胞 / 創傷治癒 / シグナル伝達分子 |
Outline of Annual Research Achievements |
今回我々は、炭酸ガスレーザーの低出力照射治療(LLLT)による皮膚創傷治癒促進効果に関し、その細胞生物学的なメカニズムを解明することを目的とした研究を行った。まず、炭酸ガスレーザーのLLLTによるヒト皮膚線維芽細胞の増殖能、遊走能への影響をみるために、播種した細胞に様々な出力条件( 0.1, 0.5, 1.0, 2.0, 5.0J/cm2)でレーザーを照射した後に、それぞれMTS assay、Scratch assayを行った。次に、1.0J/cm2の条件で炭酸ガスレーザーを照射した線維芽細胞からタンパク質を採取し、Akt, ERK, JNKといった細胞内シグナル伝達分子の活性変化を、Western Blot Analysisで解析した。最後に、Akt, ERK, JNKそれぞれの阻害剤を使用し、各種シグナル伝達経路を阻害した状態で、MTS Assay, Scratch Assay及びWestern Blot Analysisを行った。 結果として、MTS assay及びScratch assayでは、1.0J/cm2という条件のレーザー照射時に、線維芽細胞の増殖能及び遊走能が最も促進された。Western Blot Analysisでは、レーザーを照射した線維芽細胞においてAkt, ERK, JNKの活性化がみられた。また、それらのタンパク質をそれぞれ阻害すると、レーザー照射による細胞増殖能、及び遊走能促進効果が抑制され、各種シグナル伝達分子の活性化も抑制された。以上の結果から、炭酸ガスレーザーのLLLTにより、ヒト皮膚線維芽細胞の増殖能及び遊走能が促進され、またその過程にAkt, ERK, JNKといったシグナル伝達分子の活性化が大きく関わっていると示唆された。本研究により、炭酸ガスレーザー照射が創傷治療の新たな選択肢として検討されるべき根拠となる重要な結果が得られた。
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