2017 Fiscal Year Research-status Report
新規リン酸カルシウム系歯内療法材料の開発と生体反応の分子基盤構築
Project/Area Number |
16K20473
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Research Institution | Asahi University |
Principal Investigator |
長谷川 智哉 朝日大学, 歯学部, 助教 (80761585)
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Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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Keywords | リン酸カルシウム / 直接覆髄 / 生体親和性セメント / 硬組織誘導 / 歯髄由来幹細胞 / MTA |
Outline of Annual Research Achievements |
本年度は、昨年度に引き続きラット露髄モデルへの直接覆髄による材料周囲組織の応答解析と各種セメントに対する培養細胞(線維芽細胞および歯髄由来幹細胞)の応答解析行い以下の結果を得た。 まず、①ラット露髄モデルへの直接覆髄後の覆髄部での歯髄組織の反応として、炎症反応の有無を解析するために覆髄後7~14日でCD68等、マクロファージマーカーの免疫組織学的解析と、形態学的な炎症の有無を検討したところ水酸化カルシウム製剤覆髄群では覆髄7日後で炎症反応が顕著にみられたのに対し、α-TCP/Te-CPセメント覆髄群では炎症反応はみとめられなかった。 次いで、②歯髄由来幹細胞、線維芽細胞を用いた培養系での評価を行った。ところ、水酸化カルシウム製剤からの溶出物を含む培地で培養した細胞では細胞増殖が阻害され、骨芽細胞分化マーカー、象牙芽細胞マーカーの発現量に顕著な変化は見られなかったが、α-TCP/Te-CPセメントからの溶出物を含む培地はMTAセメントと比較しても細胞増殖を阻害せず、コントロール培地と同等の細胞増殖性を示し、また、MTAセメントと比較して、α‐TCP/Te-CPセメントからの溶出物を含む培地は骨芽細胞マーカーであるアルカリホスファターゼやオステオカルシン、象牙芽細胞マーカーでもあるDMP-1のmRNA発現量が顕著に増加した。以上より、α-TCP/Te-CP セメントが硬組織形成細胞への分化誘導能を有することが示された。
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Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
α-TCP/Te-CP セメントが、近年臨床生成器の評価されているMTAセメントと比較しても骨芽細胞への分化誘導能や象牙が細胞マーカーのmRNA発現を促進したことから、直接覆髄材として有望であるとの見通しを得たため。また、in vitroでの結果を解析の指標として次年度のエピジェネティック因子の解析を進めることができるため全体として順調に進んでいるといえる。
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Strategy for Future Research Activity |
本年度の結果をふまえ、各種セメント溶出物存在下での歯髄由来幹細胞と線維芽細胞の動態を細胞応答に関与するエピジェネティック因子の解析を中心にスクリーニングを行う。具体的には、DNAの脱アセチル化解析、microRNA等のエピジェネティックな因子の探索を行うほか、遺伝子の転写制御、細胞の分化調節に重要なヒストン脱アセチル化酵素(HDAC)の関与を阻害剤の1つであるトリコスタチンA (TSA)を用いて評価し、由来組織および適用するセメント材料によって、同酵素の阻害効果の違いを検討する。そして、TSA阻害による骨芽細胞分化や象牙芽細胞分化に関わる因子の発現レベルの変化を解析する。
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Research Products
(2 results)