口腔腫瘍悪性化および増殖と環境因子との相関-TRPチャネルをめぐって-

2017 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 16K20576
• Research Institution: Kobe University
• Principal Investigator: 榊原 晶子 神戸大学, 医学部附属病院, 特定助教 (00569866)
• Project Period (FY): 2016-04-01 – 2020-03-31
• Keywords: TRPVイオンチャネル

Outline of Annual Research Achievements

これまでのわれわれの研究では、生体から得られた口腔粘膜組織（舌、歯肉、頬粘膜、口底）の癌細胞と正常粘膜細胞を用いてTRPV1-4イオンチャネルの発現が癌と正常組織でどのように特徴付けられるのかを検証してきた。以下がその結果である。
real time PCR法および、免疫組織化学染色法により、①TRPV1,2,3,4全てにおいて、ヒト口腔正常粘膜（舌、歯肉、頬粘膜、口底）での発現が確認。②②口腔扁平上皮癌と口腔正常粘膜におけるTRPV1,2,3,4の発現量は、扁平上皮癌の方が有意に増加。③TRPV1,2,3,4全てにおいて、ヒト口腔正常粘で‘飲酒あり’群の方が、‘飲酒なし’群よりも有意に増加。④TRPV2,3,4において、ヒト口腔正常粘膜で‘喫煙あり’群の方が、‘喫煙なし’群よりも有意に増加しており、TRPV1も増加傾向。することを確認している。
これらの研究は、生体から採取した粘膜癌細胞、粘膜正常細胞から採取した組織で行った。培養細胞においても同様な発現が認められるのかを検証中である。生体から採取した組織から細胞を単離しようと試みたが、困難であったため、細胞提供を受けて、培養している。正常粘膜細胞の培地と癌細胞の培地でまずは光刺激でカルシウムイオンチャネルが開くことを確認しているところである。今後は、TRPVイオンチャネルの1-4のそれぞれに特有のチャネルを開く促進剤（例：カプサイシンやさまざまな温度設定）があるため、おのおので検証していく。

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

細胞培養がうまくいかず、研究が停滞したこともあったが、口腔粘膜癌細胞（HSC-3）および、口腔正常粘膜細胞（HOMK）の細胞を培養し、光照射刺激を加えることで、TRPVイオンチャネルの活性化が促進されることを確認している。カルシウムアッセイを行っているところである。今後チャネル特異的な活性促進剤を用いて研究を進めていく。

Strategy for Future Research Activity

コントロールとしての正常粘膜細胞の培養を継続し、培養細胞でもTRPV1-4のイオンチャネルが発現し、生体と同様な特徴的な発現があることを実証する。

Causes of Carryover

当初の予定よりも細胞培養がうまくいかず、必要物品や試薬の購入が後回しになっている。