2016 Fiscal Year Research-status Report
不良タンパク質の微小管輸送およびアグリソーム形成を標的とする転移性乳癌の新規治療
Project/Area Number |
16K21388
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Research Institution | Tokyo Medical University |
Principal Investigator |
風間 宏美 東京医科大学, 医学部, 助手 (00339350)
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Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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Keywords | 乳癌 / アグリソーム / 小胞体ストレス / プロテアソーム / オートファジー |
Outline of Annual Research Achievements |
本研究は,転移・再発乳癌に対してアグリソーム形成を標的とする新規治療法の開発を目的とするものであり,平成28年度は概ね計画通りに遂行できた。 転移性乳癌細胞株MDA-MB231細胞にプロテアソーム阻害剤であるボルテゾミブ(BZ)を作用させると,抗ビメンチン抗体で強陽性に染色されるアグリソームが微小管形成中心に形成された。微小管重合阻害剤であるビノレルビン(VNR)または脱重合阻害剤であるパクリタキセル(PTX)をBZと同時に作用させると,このアグリソーム形成が阻害され,小胞体(ER)ストレス負荷を介した殺細胞効果が増強した。興味深いことに,この殺細胞増強効果はVNRの方がPTXよりはるかに強かった。また,BZとVNRとのコンビネーションの優位性は他の転移性乳癌細胞でも再現された。 この現象を時系列で詳細に解析するために,1)アグリソーム形成の定量解析法としてEGFP-vimentin安定導入株(MB231-EGFP-vimentin)の樹立を,また,2)ERストレス定量解析法としてMB231-ERAI-venus安定導入株 (ERストレスに応じてXBP1のスプライシングが誘導され蛍光venusが誘導されるシステム)を作成した。この安定導入株とIncuCyte生細胞解析システムも用いることで,アグルソーム形成能ならびにERストレス負荷が経時的に簡便かつ安定して評価可能となった。 今後は,各種薬剤によるアグリソーム形成阻害能とERストレス負荷の相関性を検証し,最も効率的な薬剤の組合せの抽出を行い,さらに,乳癌細胞株移植マウスを用いてin vivoの薬理効果を検証する予定である。
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Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
アグリソーム形成およびERストレス負荷の独自の定量解析法が確立したため,今後の研究進展の加速が期待できる。
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Strategy for Future Research Activity |
アグリソーム形成能およびERストレスの定量的生細胞イメージング法がほぼ確立した。 今後はこの解析方法を駆使してアグリソーム形成を阻害するための有効な薬剤の組合せを抽出し,動物実験により薬理効果を検証していく。
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Causes of Carryover |
物品費(消耗費)が少額(6,047円)繰り越された。
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Expenditure Plan for Carryover Budget |
次年度で全額使用する予定である。
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[Journal Article] Targeting bortezomib-induced aggresome formation using vinorelbine enhances the cytotoxic effect along with ER stress loading in breast cancer cell lines.2016
Author(s)
Miyahara K, Kazama H, Kokuba H, Komatsu S, Hirota A, Takemura J, Hirasawa K, Moriya S, Abe A, Hiramoto M, Ishikawa T, Miyazawa K.
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Journal Title
Int J Oncol.
Volume: 49
Pages: 1848-1858
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
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[Journal Article] Macrolides sensitize EGFR-TKI-induced non-apoptotic cell death via blocking autophagy flux in pancreatic cancer cell lines.2016
Author(s)
Mukai S, Moriya S, Hiramoto M, Kazama H, Kokuba H, Che XF, Yokoyama T, Sakamoto S, Sugawara A, Sunazuka T, Omura S, Handa H, Itoi T, Miyazawa K.
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Journal Title
Int J Oncol.
Volume: 48
Pages: 45-54
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
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[Journal Article] Macrolide antibiotics exhibit cytotoxic effect under amino acid-depleted culture condition by blocking autophagy flux in head and neck squamous cell carcinoma cell lines.2016
Author(s)
Hirasawa K, Moriya S, Miyahara K, Kazama H, Hirota A, Takemura J, Abe A, Inazu M, Hiramoto M, Tsukahara K, Miyazawa K.
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Journal Title
PLoS One.
Volume: -
Pages: -
DOI
Peer Reviewed / Open Access / Acknowledgement Compliant
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