シュマレンベルクウイルスと同様の遺伝子再集合体ウイルスが国内に現れる可能性の検証

2017 Fiscal Year Research-status Report

• Project/Area Number: 16K21609
• Research Institution: National Agriculture and Food Research Organization
• Principal Investigator: 白藤 浩明 国立研究開発法人農業・食品産業技術総合研究機構, 動物衛生研究部門, 主任研究員 (40414726)
• Project Period (FY): 2016-04-01 – 2019-03-31
• Keywords: アルボウイルス / 牛 / 異常産 / オルソブニヤウイルス / リアソートメント / 小動物モデル

Outline of Annual Research Achievements

欧州では2011年にオルソブニヤウイルス属のシュマレンベルクウイルス（Schmallenberg virus：SBV）が出現し、牛、山羊、めん羊といった反芻動物の生産に甚大な被害を及ぼした。このSBVは、分類上同一の属（オルソブニヤウイルス属）に分類されるサシュペリウイルス（Sathuperi virus：SATV）とシャモンダウイルス（Shamonda virus：SHAV）の遺伝子再集合によって生じたウイルスと考えられている。一方、わが国ではSATVとSHAVの両ウイルスがこれまでに野外で分離されているが、欧州で発生したような大規模な家畜の被害は認められていない。このことを踏まえ、本研究ではSBVと同様のゲノム、増殖性および病原性をもつ遺伝子再集合体（リアソータント）ウイルスがわが国に出現する可能性を検討する。加えて、リアソータントウイルスの病原性評価や新規ワクチンの有効性評価に活用可能な、アルボウイルスによる牛異常産の小動物モデルの構築を目指す。
平成29年度は、前年度に続き、培養細胞にSATVとSHAV（いずれも日本国内分離株）を重複感染させ、リアソータントウイルスの生成を観察した。その結果、5通りのリアソータントウイルスが回収された。また、アルボウイルスによる牛異常産の小動物モデル構築のため、ハムスターの妊娠個体を用いてアカバネウイルス（Akabane virus：AKAV）の感染実験を行った。今回は、日本国内で分離された2つのGenogroupのAKAVを使用し、妊娠9日目の個体に接種した結果、いずれのGenogroupでも異常産が起こることが明らかになった。なお、胎子には外貌に異常のない個体や、奇形を伴う流産胎子、ミイラ化胎子が含まれていた。

Current Status of Research Progress

2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.

Reason

リアソータントウイルスの生成に関する実験については、今年度の追試により、前年度より多くのリアソータントウイルスが回収されていることから、順調に進捗しているといえる。一方、牛の血管内皮細胞でのSATVおよびSHAVの重複感染を行うべく、牛大動脈内皮細胞へのSATVやSHAVの接種を実施したが、盲継代を行ってもウイルスの増殖が確認されなかった。そのため、次年度は他の種類の牛由来血管内皮細胞への接種を試みることとする。
牛異常産の小動物モデル構築に関しては、妊娠ハムスターを用いたAKAV感染実験により異常産の発生が観察されており、予定通りに進捗している。

Strategy for Future Research Activity

リアソータントウイルスの生成に関する実験については、これまでに得られたリアソータントウイルスの培養細胞における増殖性の観察や、哺乳類における病原性の観察を平成30年度に実施する。加えて、SATVやSHAVが増殖可能な牛由来細胞の探索を行い、感受性細胞が得られた場合にはSATVとSHAVの重複感染を試みる。
牛異常産の小動物モデル構築に関しては、妊娠ハムスターのAKAV感染によって生じた異常産について、胎子および親の各種臓器におけるウイルス遺伝子、ウイルス抗原および組織病変の検索を行う。加えて、AKAV同様に牛での野外症例および感染実験例があるアイノウイルスについて、妊娠ハムスターへの接種試験を行い、異常産の発生の有無を観察する。