2008 Fiscal Year Annual Research Report
INK4A/ARF遺伝子座の染色体レベルでの発現調節と細胞老化における役割
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17013064
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| Research Institution | Japanese Foundation For Cancer Research |
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Principal Investigator |
原 英二 Japanese Foundation For Cancer Research, がん生物部, 部長 (80263268)
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| Keywords | INK4A / ARF遺伝子座 / p16^<INK4a> / イメージング / 染色体 / 発癌ストレス / 加齢 |
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| Research Abstract |
INW4A/ARF遺伝子座には2つの重要な癌抑制遺伝子であるp16^<INK4a>遺伝子とARF遺伝子が一部重複してコードされており、それら遺伝子の発現は染色体構造の変化によって精密に調節されている。しかしその発現制御メカニズムの実体については殆ど明らかにされていない。我々はこれまでBacterial Artificial Chromosome(BAC)ベクターに組み込まれた完全長のマウスINW4A/ARF肝遺伝子座を含む染色体断片を改変することにより、p16^<INK4a>遺伝子の発現をマウスの生体内でしかも染色体レベルでリアルタイムに解析出来る新しいレポーターシステムの開発に成功した。本研究では、これらのシステムを用いてこれまで解析が困難であったINW4A/ARF遺伝子座の染色体レベル及び個体レベルでの発現調節機構の解明とその破綻による発がんメカニズムを解明することを目的としている。本年度はBACベクターに組み込まれた完全長のヒトムINW4A/ARF遺伝子座を含む染色体断片を改変することにより、ヒトp16^<INK4a>遺伝子の発現をルシフェラーゼ活性で測定できる組み換えBACベクターを構築した。更に同様のBACレポーターをヒトARF遺伝子についても構築し、これらのBACレポーターを様々な培養細胞既に導入し、発現様式を解析した。また、既に作製済みであるマウスのp16^<INK4a>遺伝子およびARF遺伝子に対するBACレポーターを導入した細胞株と比較検討することで、ヒトとマウスにおけるINW4A/ARF遺伝子座の発現調節様式の相違点を検討した。その結果、p16^<INK4a>遺伝子については調べた限り全ての点においてヒトとマウスにおいて発現パターンに差は認められなかったが、ARFにおいてはヒトのARF遺伝子の場合と異なり、マウスARF遺伝子は活性化型Rasによりその転写活性が著しく上昇した。
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