2006 Fiscal Year Annual Research Report
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17014068
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| Research Institution | Ehime University |
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Principal Investigator |
東山 繁樹 愛媛大学, 大学院医学系研究科, 教授 (60202272)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
森本 千恵 愛媛大学, 大学院医学系研究科, 講師 (10332826)
檜枝 美紀 愛媛大学, 大学院医学系研究科, 講師 (00380254)
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| Keywords | HB-EGF / HB-EGF-CTF / repressor / PLZF / Bcl6 / c-myc / 増殖因子 / 細胞増殖 |
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| Research Abstract |
HB-EGF-CTFシグナルの標的リプレッサーとしてPLZFを同定したが、その他のリプレッサーがHB-EGF-CTFシグナルの標的になりうるのかどうかを検討するために、PLZFの属するBTB/POZ-ZnFファミリーで一次構造上最も類似しているBcl-6について検討を加えた。その結果、まず免疫沈降法ならびにGST-pull downによりBcl-6がHB-EGF-CTFと結合することが確認できた。次に、Bcl-6が細胞周期制御因子の一つcyclin D2の遺伝子発現抑制をしていることが報告されていることから、cyclin D2 promoter-Luciferaseをレポーター遺伝子として用いてBcl-6によるcyclin D2遺伝子の発現抑制をHB-EGF-CTFが解除するかどうかを検討した。Bcl-6結合部位に変異を入れたミュータントcyclin D2 promoter-Luciferaseをコントロールとしてヒト繊維芽肉腫細胞株HT1080細胞でLuciferaseアッセイを行った。まず内在性Bcl-6の転写抑制活性がBcl-6特異的siRNAによる遺伝子ノックダウンにより有意に阻害されることを確認した。このアッセイシステムに野生型proHB-EGF、shedding抵抗性ミュータントproHB-EGF、細胞内ドメイン欠損ミュータントproHB-EGFΔcの各遺伝子を導入し,TPA処理によりsheddingを誘導した。その結果、野生型を導入した細胞でのみBcl-6による転写抑制が解除された。以上の結果からHB-EGF-CTFがBcl-6による転写抑制を解除することができると結論づけた。
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[Journal Article] Pbx1 is a major target of PLZF-mediated melanoma cell growth suppression.2007
Author(s)
Shiraishi, K., Yamasaki, K., Nanba, D., Inoue, H., Hanakawa, Y., Shirakata, Y., Hashimoto, K., Higashiyama, S.
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Journal Title
Oncogene 26
Pages: 339-348
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[Journal Article] PLZF regulates Pbx1 transcription and Pbx1-HoxC8 complex leads to androgen-independent prostate cancer proliferation.2006
Author(s)
Kikugawa, T., Kinugasa, Y., Shiraishi, K., Nanba, D., Nakashiro K., Tanji, N., Yokoyama, M., Higashiyama, S.
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Journal Title
The Prostate 66
Pages: 1092-2099
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[Journal Article] Activity-dependent shedding of heparin-binding EGF-like growth factor in brain neurons.2006
Author(s)
Shishido, Y., Tanaka, T., Piao, Y.S., Araki, K., Takei, N., Higashiyama, S., Nawa H.
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Journal Title
Biochem Biophys Res Commun. 348
Pages: 963-970
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[Journal Article] Loss of HB-EGF in smooth muscle or endothelial cell lineages causes heart valve malformation and cardiac hypertrophy.2006
Author(s)
Nanba, D., Kinugasa, Y., Morimoto, C., Koizumi, M., Yamamutra, H., Takahashi, K., Takakura, N., Mekada, E., Hashimoto, K., Higashiyama, S.
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Journal Title
Biochem Biophys Res Commun. 350
Pages: 315-321
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