2008 Fiscal Year Annual Research Report
脳の発生発達過程における神経幹細胞の増殖と分化を制御する分子メカニズムの解明
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17024001
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| Research Institution | Tohoku University |
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Principal Investigator |
大隅 典子 Tohoku University, 大学院・医学系研究科, 教授 (00220343)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
高橋 蒋文 東北大学, 大学院・医学系研究科, 助教 (20361074)
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| Keywords | 神経発生 / 細胞増殖 / 細胞分化 / 転写因子 / Pax6 / タイムラプス解析 / RNA干渉法 / マイクロアレイ法 |
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| Research Abstract |
【神経上皮細胞の細胞周期依存的核移動の解析】
Pax6変異胚大脳原基の神経上皮細胞における中心体の不安定化を説明し得る分子を探索し、Pax6変異体において顕著に発現が減少している分子Nineinを同定した。予備的な実験ではあるが、Nineinに対するSiRNAを野生型ラット大脳皮質原基へ導入することで、Nineinの中心体での局在は見られなくなり、SiRNAの効果が確かめられた。リン酸化ヒストン陽性のM期細胞は神経上皮脳室面より離れたところで異所的に存在しており、Pax6変異体で見られたM期細胞の分散パターンに類似していた。さらに表現型が強いものは、上皮構造が維持されず、脳室面において神経分化が認められた。以上の結果より、NineinはPax6によりその発現または局在が制御され、中心体と微小管との結合を安定化することにより、正常なエレベーター運動に寄与する可能性が考えられた。今後さらに詳細な解析を行う予定である。
【神経上皮細胞基底側におけるCyclhD2の局在に関する解析】
電気穿孔法と哺乳類全胚培養法を組み合わせて、非常に簡便なRNA輸送配cis配列アッセイ法を確立した。この新しい方法により、細胞周期調節因子CyclinD2のmRNAの神経上皮細胞基底膜末端輸送cis配列を同定した。この配列は50bpの配列からなり、既に報告されているRNA結合蛋白質結合配列のどれとも類似しない新規の配列であった。また、CyclinD2タンパク質の基底膜末端での局在様式と細胞周期との関連性を調べるために、M期の神経上皮細胞基底膜末端を染色することが知られている、リン酸化ビメンチン抗体とMPM2抗体を用いて、CyclinD2抗体との2重免疫染色を行った。CyclinD2タンパク質はこれらのマーカータンパク質と共局在を示し、M期特異的に、基底膜末端で局所的翻訳される可能性を見出した。
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[Journal Article] Development of the mouse amygdala as revealed by enhanced green fluorescent protein gene transfer by means of in utero electroporation2008
Author(s)
Soma, M., Aizawa, H., Ito, Y., Maekawa, M., Osumi, N., Nakahira, E., Okamoto, H., Tanaka K. and Yuasa, S.
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Journal Title
J Comp Neurol 513
Pages: 113-128
Peer Reviewed
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[Book] Springer2009
Author(s)
Nomura, T., Takahashi, M. and Osumi. N.
Total Pages
129-141
Publisher
Electroporation into cultured mammalian embryos
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