2009 Fiscal Year Annual Research Report
G蛋白質シグナルによる物質輸送ダイナミズムのバイオイメージング解析
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17079009
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| Research Institution | National Cardiovascular Center Research Institute |
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Principal Investigator |
望月 直樹 National Cardiovascular Center Research Institute, 循環器形態部, 部長 (30311426)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
福原 茂朋 国立循環器病センター研究所, 循環器形態部, 室長 (70332880)
三浦 浩一 国立循環器病センター研究所, 循環器形態部, 室長 (20360349)
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| Keywords | 低分子量G蛋白 / 情報伝達 / 輸送 / ミオシン |
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| Research Abstract |
昨年度VE-cadherinの細胞間接着部位における挙動について、調べるためにFluorescence recovery after photobleaching (FRAP)でVE-cad-EGFPで検討した。今年度は、さらにFRAPによってcAMP-Epac-Rap1によるVE-cadherinの安定化機構を調べた。VE-cadherin-EGFP,PECAM-1-EGFPの安定化をcAMP刺激によって確認したところ、VE-cadherinのみ安定化がおきることがわかった。これは、VE-cadherinの細胞内ドメインが、重要と考えVE-cadherinの細胞内ドメインを欠失したVEcadherin-delta Cyto-EGFPをFRAPで検討したところ、安定化がみられなかった。このため、β-catenin/α-cateninによるアクチン細胞骨格系へのVE-cadherinのリンクによって、VE-cadherinの細胞間接着への安定化がもたらされると考えた。この仮説を検証するために、VE-cadherinの細胞内ドメインをa-cateninに置換した変異VE-cadherinは、cAMP-Epac-Rap1による安定化が回復した。以上より、cAMP-Epac-Rap1はまず、corticalactinの束化(昨年までの成果)を促進して、さらにα-catenin/β-cateninを介してVE-cadherinを束化したアクチンにリンクすることでVE-cadherinの細胞間接着での安定化を起こすことを明らかにした。
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