| Research Abstract |
Cdc7は,酵母からヒトまで保存されたキナーゼで,DNA複製の開始を制御する。分裂酵母ホモログHsk1はSwil(複製フォーク保護複合体の因子)と遺伝的,物理的に相互作用し,DNA損傷存在下での複製フォークの適切な停止に必要である。複製フォーク停止により誘導されるチェックポイントキナーゼの活性化にCdc7は必要とされる。Cdc7欠損下で,チェックポイントメディエーターの,Claspin(Mrc1ホモログ)のリン酸化およびクロマチン結合が起こらない。Cdc7はClaspin(Mrc1)と相互作用し,in vitroでこれをリン酸化する。これらの事実から,Cdc7は複製フォークでSwil/Swi3/Mrc1と相互作用しつつ,フォークの安定な維持に重要な役割を果たしている可能性が示唆された。又,hsklの欠損がmrclの欠損により相補されることを発見した。複製中間体解析からMrc1は複製起点でのbubble形成を阻害すること,ChIP解析からMrclはCdc7/Hsk1に依存せずに起点に結合し,Cdc7/Hsk1に依存して複製フォークとともに移動することが明らかとなった。Mrc1は複製起点に結合し,二本鎖の開裂に阻害的に機能し,Cdc7がこの阻害を解除する可能性が示唆された。Cdc7は組換え開始に必要なDSB形成に必須な役割を果たす。DSB導入複合体の形成に必要なMer2タンパクが標的の一つであること,さらにそのリン酸化部位も同定した。Cdc7キナーゼは,in vitroにおいてspermineなどのpolyamineにより著しく活性化される。がん細胞ではCdc7欠損により,細胞はS期停止の後に異常な細胞分裂に進行して死滅する。分裂酵母と動物細胞の解析からCdc7は,M期の進行に要求されることが示唆された。動物細胞では,Cdc7はCyclinBの核移行に影響を与える。
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