2006 Fiscal Year Annual Research Report
ホヤ挿入突然変異体の大規模スクリーニングとその解析
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17207013
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| Research Institution | Kyoto University |
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Principal Investigator |
佐藤 矩行 京都大学, 大学院理学研究科, 教授 (30025481)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
笹倉 靖徳 筑波大学, 大学院生命環境科学研究科, 講師 (10400649)
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| Keywords | カタユウレイボヤ / 発生遺伝学 / 挿入突然変異体 / 発生・分化 / 遺伝子機能 / 大規模スクリーニング / マイクロアレイ / 変態 |
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| Research Abstract |
本研究においては、脊索動物尾索類カタユウレイボヤ(Ciona intestinalis)への発生遺伝学的研究手法の導入をめざしている。カタユウレイボヤの世代時間は2-3ヶ月と短く、しかもトランスポゾンの一種Minosがこのホヤにおいて活性をもち、MinosトランスポゾンをゲノムDNAに挿入したトランスジェニックライン作製系を確立した。そこで、年間50以上のカタユウレイボヤ突然変異体の単離を目標にMinos挿入変異体の大量スクリーニングを行い、得られた突然変異体の原因遺伝子の同定し、さらにその作用機構をマイクロアレイを用いて解析するとともに、突然変異体リソースを作製し、カタユウレイボヤにおける発生遺伝学の基盤を確立する。
本年度はカタユウレイボヤの遺伝子トラップ系統80系統の作製、50系統のスクリーニングを行い、ホヤ変態期突然変異体sj-4およびtail regression failed(trf)を単離した。このうちtrfを詳細に解析した。trfは変態途中で尾部の吸収が生じない異常が認められる一方で、成体組織の成長が進行し、尾部を持った幼若体の形態をとる。このことから、ホヤ変態イベントの制御には2つの独立したパスウェイの存在が示唆される。またパラミューテーション様の現象を示すトランスジェニックラインを発見した。すなわち突然変異体sjの持つトランスポゾン挿入が他のトランスジェニックラインのGFP発現を抑制する。これがsjの母性因子により引き起こされること、また抑制は転写レベルで生じることを突き止めた。パラミューテーションは植物とマウスのみで知られており、ホヤでよく似た現象が生じることは興味深い。
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