2005 Fiscal Year Annual Research Report

植物ウイルスにおける分子擬態の解明とそれを利用したポティウイルスベクター群の開発

Research Project

Project/Area Number	17208004
Research Institution	Utsunomiya University
Principal Investigator	夏秋知英宇都宮大学, 農学部, 教授 (10134264)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	塚本利朗宇都宮大学, 遺伝子実験施設, 助教授 (30236864) 三好洋聖マリアンナ医科大学, 医学部, 助手 (80322519)
Keywords	ポティウイルス / 分子擬態 / カボチャモザイクウイルス / ズッキーニ黄斑モザイクウイル / カブモザイクウイルス / ウイルスベクター / eIF(iso)4E / VPg
Research Abstract	本研究では、植物ウイルスのうち(+)ssRNAをゲノムとするポティウイルスを用い、ウイルスの根本的な性状である「どのように宿主細胞を欺いて優先的にウイルスの遺伝情報を翻訳し、ウイルス核酸を増殖させ、抵抗性(ジーンサイレンシング)を回避し、全身感染するのか」という点について、ウイルスタンパク質を分子擬態という視点から捉え直してその機能を解明することを第一の目的としている。次に、ウイルスタンパク質の分子擬態を人為的に制御して、宿主範囲が狭く、宿主に病徴を引き起こさず、媒介昆虫で媒介されず、複数の外来遺伝子が挿入可能、という性状を持つより有用なウイルスベクターを開発することを第二の目的としている。本年度は各種ポティウイルスにおいて各種タンパク質を解析した。そのうち、核膜局在性を有するP1タンパク質では、カボチャモザイクウイルス(WMV)およびズッキーニ黄斑モザイクウイルス(ZYMV)で組換えがおきていることを発見した。特にZYWVでは世界初の報告である。ジーンサイレンシングサプレッサー活性を有するHC-Proタンパク質では、弱毒ウイルス(ワクチン)株の病原性に関与していることを明らかにした。カブモザイクウイルス(TuMV)のVPgタンパク質では、植物タンパク質のeIF(iso)4EとVPgが結合していることを明らかにし、さらにTuMVのVPgに人工的に変異を導入すると感染が阻害されることも明らかにした。また、TuMVとZYMVではマーカーとなる緑色蛍光色素(GFP)遺伝子、あるいはその変異体である青(CFP)や黄色(YFP)の遺伝子をモデルとして組み込んだウイルスベクターを構築した。