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2007 Fiscal Year Annual Research Report

糖尿病治療のための幹細胞操作技術の開発

Research Project

Project/Area Number 17209043
Research InstitutionYokohama City University

Principal Investigator

谷口 英樹  Yokohama City University, 医学研究科, 教授 (70292555)

Keywords幹細胞 / 糖尿病 / 膵島 / 再生
Research Abstract

糖尿病に対する再生治療の臨床応用に向けた基盤技術の開発を目的として、膵細胞集団の中から、極少数しか存在せずかつ形態によって区別することが難しい多能性を持つ幹細胞を、FACS(fluorescence activatedcell sorter)を用いた精度の高い細胞分離法により純化・回収し、それらの分化・増殖・自己複製機構を解析することを試みている。本年度は、膵発生における細胞系譜を系統的に解析することのできるpdx1-DsRed/ngn3-EGFPトランスジェニックマウスを用いて、フローサイトメトリーにより膵幹細胞および膵前駆細胞を分離し特性解析を行った。すなわち、pdx-1-DsRed2及びngn3-EGFPトランスジェニックマウスを交配させ、作出したpdx1-DsRed/ngn3-EGFPトランスジェニックマウス(新生仔)から膵幹細胞および膵前駆細胞を選択的に分離し、各細胞集団の特性をin vitroコロニーアッセイ系を用いて解析した。新生仔膵臓細胞はフローサイトメトリーを用いたDsRed2蛍光強度とSide Scatter(SSC)に基づく2パラメーター解析により、DsRed2陰性画分、DsRed2^<dim>SSC^<mid>画分、DsRed2^<low>SSC^<low>画分、DsRed2^<mid>SSC^<high>画分、DsRed2^<high>SSC^<high>画分の5つの細胞画分に分画化できることが判明した。各細胞集団のクローン性コロニー形成能を解析したところ、クローン性コロニー形成能を有した細胞(colony forming unit: CFU)は、DsRed2^<dim>SSC^<mid>画分に限定的かつ高頻度に存在していることが明らかとなった。DsRed2^<dim>SSC^<mid>画分中に存在するCFUが有する多分化能を解析した結果、コロニー内の一部にβ細胞マーカーであるInsulin、C-peptide、α細胞マーカーであるGlucagon、膵外分泌細胞マーカーであるAmylaseをそれぞれ発現する細胞が存在した。このことから、DsRed2^<dim>SSC^<mid>細胞中に高い増殖能、多分化能を有する細胞が高頻度かつ限定的に存在することが明らかとなった。一方、Pdx1-DsRed/ngn3-EGFPトランスジェニックマウスから分離した膵臓細胞におけるDsRed2(pdx-1)およびEGFP(ngn3)の発現解析から、膵内分泌前駆細胞はDsRed2^<mid>SSC^<high>画分中に限定的に存在すると考えられた。現在、論文投稿準備中である。

  • Research Products

    (10 results)

All 2008 2007

All Journal Article (3 results) (of which Peer Reviewed: 3 results) Presentation (6 results) Book (1 results)

  • [Journal Article] Tbx3 controls the fate of hepatic progenitor cells in liver development by suppressing p19ARF expression2008

    • Author(s)
      Suzuki A, Sekiya S, Buscher D, Izpisua Belmonte JC, Taniguchi H
    • Journal Title

      Development 135

      Pages: 1589-1595

    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Adult rat hepatic bipotent progenitor cels remain doramant even after extensive hepatectomy2007

    • Author(s)
      Yamamoto Y, Togo S, Yun-wen Zheng, Kubota T, Taniguchi H, Shimada S
    • Journal Title

      Sound Repair and Regeneration 15

      Pages: 422-429

    • Description
      「研究成果報告書概要(和文)」より
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Enhanced self-renewal capability in hepatic stem/progenitor cells drives cancer initiation2007

    • Author(s)
      Chiba T, Zhen YW, Kita K, Yokosuka O, Saisho H, Onodera M, Miyoshi H, Nakano M, Zen Y, Nakanuma Y, Nakauchi H, Iwama A, Taniuchi H
    • Journal Title

      Gastroenterology 133

      Pages: 937-950

    • Peer Reviewed
  • [Presentation] 膵島創出へ向けた細胞操作技術の開発2007

    • Author(s)
      谷口 英樹、仲野 晶、岡村 愛、田中 順三
    • Organizer
      第34回日本臓器保存生物医学会学術集会
    • Place of Presentation
      札幌
    • Year and Date
      20071116-17
    • Description
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [Presentation] Excessive self-renewal of hepatic: stem/progenitor cells drives cancer initiation2007

    • Author(s)
      Taniguchi H
    • Organizer
      第66回日本癌学会学術総会
    • Place of Presentation
      横浜
    • Year and Date
      20071003-05
  • [Presentation] ヒト研究用モデル細胞としての幹細胞クローン2007

    • Author(s)
      谷口 英樹
    • Organizer
      第25回日本ヒト細胞学会学術集会
    • Place of Presentation
      東京
    • Year and Date
      20070903-04
    • Description
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [Presentation] 膵幹細胞の可視化による非対称分裂の解析2007

    • Author(s)
      谷口 英樹
    • Organizer
      第17回日本サイトメトリー学会学術集会
    • Place of Presentation
      東京
    • Year and Date
      20070705-06
    • Description
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [Presentation] 組織幹細胞と"がん幹細胞"2007

    • Author(s)
      谷口 英樹
    • Organizer
      第19回日本肝胆膵外科学会・学術集会
    • Place of Presentation
      横浜
    • Year and Date
      20070607-08
    • Description
      「研究成果報告書概要(和文)」より
  • [Presentation] Excessive self-renewal of hepatic stem cells derives cancer initiation2007

    • Author(s)
      Taniguchi H
    • Organizer
      2007 Soon Chun hyang Stem Cell Symposium
    • Place of Presentation
      Seoul
    • Year and Date
      2007-09-15
  • [Book] 再生医療工学の技術2007

    • Author(s)
      谷口英樹(分担執筆)
    • Total Pages
      251
    • Publisher
      シーエムシー出版

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Published: 2010-02-04   Modified: 2016-04-21  

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