2006 Fiscal Year Annual Research Report

神経アクチン細胞骨格制御に関わるRhoならびにCa^<2+>シグナル伝達機構の解明

Research Project

Project/Area Number	17300116
Research Institution	The University of Tokyo
Principal Investigator	尾藤晴彦東京大学, 大学院医学系研究科, 助教授 (00291964)
Keywords	脳・神経 / 酵素 / 遺伝子 / シグナル伝達 / 生体分子
Research Abstract	初年度の解析結果に基づき、樹状突起形成・伸展を制御するCaMK分子種をスクリーニングした。大脳皮質培養細胞の樹状突起形成は、CaMKIα、CaMKIIやCaMKIVのRNAiでは全く阻害されず、CLICK-III/CaMKIγのRNAiのみ顕著な短縮を認めた。一方、CLICK-III過剰発現により樹状突起伸展が促進した。さらに、1)RNAiによって、Rac活性が低下し、2)RNAi表現型がdominant active Racによって回復し、3)CLICK-III過剰発現表現型がRacGEFであるSTEFのdominant negative体により消失すること、などから、CLICK-III/CaMKIγ-STEF-Rac経路の重要性が示された(Takemoto-Kimura et al.改訂中)。続いて、CaMK類似キナーゼであるCLICK-I/DCAMKL1およびCLICK-II/DCaMKL2の樹状突起形態に対する影響を調べたところ、doublecortin領域を有するアイソフォームでは、過剰発現により微小管bundlingを起こすが、アクチン骨格への大きな影響は見られなかった(Ohmae et al.J.Biol.Chem.2006)。一方Purkinje細胞樹状突起は、長時間脱分極によりアクチン再編成が起こるが、アクチンとカルシウム流入によりどのような蛋白複合体が制御されているかを探索した結果、scaffoldであるShankの局在が顕著に変化することを明らかにした(Fuse et al.準備中)。また、成宮研究室と共同研究を実施した結果、細胞移動時のRho-mDia1依存的アクチン骨格再編成により、ApcやSrcの複合体の位置が制御されていることを明らかにした(Yamanaetal.Mol.CellBiol.2006)。