2006 Fiscal Year Annual Research Report
トリパノソーマの細胞内寄生・増殖・病原性の分子基盤
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17390123
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| Research Institution | Juntendo University |
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Principal Investigator |
青木 孝 順天堂大学, 医学部, 教授 (20053283)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
奈良 武司 順天堂大学, 医学部, 講師 (40276473)
橋本 宗明 順天堂大学, 医学部, 講師 (30407308)
案浦 健 順天堂大学, 医学部, 助手 (90407239)
坪内 暁子 順天堂大学, 医学部, 助手 (10398662)
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| Keywords | トリパノソーマ / マイクロアレイ / リアルタイムPCR / 増殖促進因子のdownregulation / 増殖抑制因子のupregulation / cFLIPのユビキチン化 / アポトーシス抑制 / ピリミジン合成遺伝子 |
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| Research Abstract |
T.cruziは感染細胞内で分裂・増殖することから、宿主細胞因子に依存または積極的に利用していると考えられるが、分子レベルでの解明はほとんどなされていない。今回我々は、約47,000個の転写産物を含むマイクロアレイを用い、感染細胞HeLaの遺伝子発現を解析した。感染細胞と非感染細胞を比較し、3倍以上upregulateされた遺伝子41個、downregulateされた遺伝子23個を認めた(p<0.05,n=3)。また、マイクロアレイデータの信頼性はリアルタイPCRにより確認した。上記の64個の遺伝子にはIL6、IL8などのサイトカインや細胞増殖に関わる遺伝子の割合が高かった。興味深いことに感染細胞では、細胞増殖促進因子7個はすべてdownregulateされ、細胞増殖抑制因子3個はすべてupregulateされていた。すなわちT.cruzi染細胞の増殖速度は著しく低下し、原虫の持続感染が保障されるメカニズムの一端が明らかとなった。
この現象と深くかかわり、T.cruziが感染すると宿主細胞のアポトーシス抑制因子cFLIPを大量に蓄積させ、アポトーシスを強く抑制する。このことは本原虫の宿主体内における生き残り、したがって病原性からみても非常に重要である。細胞内cFLIPタンパクの発現量は、転写およびユビキチン(Ub)-プロテアソーム分解系のバランスによって決定される。今回、我々は感染細胞におけるcFLIPのUb化について調べた。抗UB抗体による免疫共沈タンパク質に対して抗cFLIP抗体によるウエスタンブロッティングをおこなったところ、Ub化されたcFLIPタンパクは感染細胞の方が非感染細胞よりも有意に少なかった。このことは、T.cruzi感染によりcFLIPのUb化が特異的に阻害されており、したがってcFLIPが蓄積しアポトーシスを抑制する(原虫は生き延びる)ことを示している。
さらに、トリパノソーマ類に特異的なピリミジン生合成第4遺伝子および第6-第5融合遺伝子の分子進化を追跡する目的で、祖先型生物群diplonemidsの第4、第5、第6酵素遺伝子の解析をおこない、これら遺伝子のキネトプラスチダ類、特にT.cruziに至る起源および進化について興味深い結果を得た。
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[Journal Article] Antibody isotype responses to paramyosin, a vaccine candidate for schistosomiasis, and their correlations with resistance and fibrosis in patients infected with Schistosomiasis japonicum in Leyte, The Philippines2007
Author(s)
Nara T, Iizumi K, Ohmae H, Sy OS, Tsubota S, Inaba Y, Tsubouchi A, Tanabe M, Kojima S, Aoki T
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Journal Title
American Journal of Tropical Medicine and Hygiene 76
Pages: 384-391
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