2008 Fiscal Year Annual Research Report
HIV-1タイ型CRF01‐AEの高アポトーシス誘導機序の解明とその制御法の開発
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17390135
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| Research Institution | Osaka University |
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Principal Investigator |
生田 和良 Osaka University, 微生物病研究所, 教授 (60127181)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
作道 章一 大阪大学, 微生物病研究所, 助教 (10397672)
亀岡 正典 大阪大学, 微生物病研究所, 特任准教授 (60281838)
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| Keywords | HIV-1 / CRF01_AE / B型 / タイ / Env / Pol / 中和抗体 / プロテアーゼ阻害剤 |
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| Research Abstract |
タイ人HIV-1感染者からタイ型HIV-1(AE型)を分離した。AE型ウイルス株のenvおよびpol遺伝子をPCR増幅し、それら増幅産物のクローニングを行い、B型の分子クローンであるpNL4-3へ組換えることにより、それぞれEnvとPolの機能を検討した。
欧米で拡がっているB型により作製された抗Env gp120単クローン抗体ではほとんど感染阻止が認められなかったが、抗Env gp41単クローン抗体では強い感染阻止が認められた。また、AE型患者由来の血清についてもAE型ウイルスにのみ有効な中和抗体が存在していることが明らかになった。そこで、Env gp41に対する中和抗体誘導型ワクチン開発を目指し、in silico解析から、B型HIV-1のgp41C34ドメイン中のN34との相互作用に影響を与えると考えられるアミノ酸残基にアミノ酸置換を導入することにより、ウイルス産生は認められ、CD4+T細胞への吸着も野生型と同様に認められるが、その後の融合機能を消失したウイルスを作成することができた。このウイルス粒子は細胞に吸着後、野生型で瞬時に進行する融合過程がブロックされ、Env gp41構造が免疫細胞に長期間晒される構造と考えられ、抗Env gp41抗体誘導に適していると考えられる。
また、AE型HIV-1のPol蛋白質の機能として、これまで世界的に用いられている、B型HIV-1に基づいて開発されてきたプロテアーゼ阻害剤に対する感受性について検討した。その結果、プロテアーゼ阻害剤に耐性を示す株が多数認められ、それらの耐性に関わると考えられる多くのアミノ酸置換は自然多型性に依っていると考えられた。
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