2006 Fiscal Year Annual Research Report
メタボリックシンドローム発症遺伝因子:新しい食事誘導性蛋白の同定とその機能解析
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17390262
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| Research Institution | Shiga University of Medical Science |
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Principal Investigator |
柏木 厚典 滋賀医科大学, 医学部, 教授 (20127210)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
前川 聡 滋賀医科大学, 医学部, 助教授 (00209363)
西尾 善彦 滋賀医科大学, 医学部, 講師 (40281084)
前田 士郎 独立行政法人理化学研究所, 遺伝子多型研究センター, チームリーダー (50314159)
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| Keywords | RBMX / SREBP-1c / 肝細胞 / 遺伝子発現調節 |
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| Research Abstract |
我々はSREBP-1c遺伝子のプロモーター-468番塩基を中心とした塩基配列を認識する未知の転写調節因子が食事誘導性の肝SREBP-1発現に重要な役割を果たしている可能性を見いだし,この-468番塩基を認識する蛋白の同定を試みた。SREBP-1c遺伝子のプロモーター-468番塩基を中心とした20塩基の2本鎖DNAに結合する核蛋白を抽出しMALDl-TOF MASS解析を行ない、RNA-binding potif protein chromosome X (RBMX)を同定した。
RBMXは昨年報告したようにSREBP-1cプロモーター活性は5-7倍増加させるが、イーストone-hybrid systemを用いたDNA結合能の解析では、RBMXそのものはDNA結合能を認めなかった。そこで、RBMXに結合し、SREBP-1c遺伝子のプロモーターにも結合しうる蛋白をイーストone-hybrid system及び、two-hybrid systemを用いて検索したところ両方の解析で共通の蛋白が検出された。この蛋白は、ln VitroでRBMXと結合活性を持ち、細胞内でもGST pull down法により結合が確認できた。また、ゲルシフト解析よりSREBP-1c遺伝子のプロモーター-468番塩基を中心とした20塩基の2本鎖DNAに結合し、siRNAによるノックダウンによりRBMXのSREBP-1cプロモーター活性化作用を70%低下させた。
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