2005 Fiscal Year Annual Research Report
エピジェネティックコードによる造血幹細胞の増殖分化制御機構に関する研究
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17390300
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| Research Institution | Shinshu University |
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Principal Investigator |
小池 健一 信州大学, 医学部, 教授 (40143979)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
上條 岳彦 信州大学, 医学部附属病院, 講師 (90262708)
塩原 正明 信州大学, 医学部附属病院, 講師 (00293514)
中沢 洋三 信州大学, 医学部, 助手 (60397312)
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| Keywords | 造血幹細胞 / p15遺伝子 / GM-CSF / MO7e細胞 / メチル化 |
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| Research Abstract |
GM-CSFによるメチル化誘導機構をGM-CSF依存性白血病細胞株であるMO7e細胞株を用いて検討した。MO7eのp15のプロモーター領域の27個のCpG sitesはGM-CSF存在下でほとんどすべてのallelleがメチル化されていた。GM-CSFとFBSを除去すると、time-dependentにメチル化率は低下した。GM-CSF非存在下で48hr培養後、GM-CSFを再添加するとメチル化率は増加し、24hr後ほぼすべてのalleleはメチル化された。p15の蛋白質はメチル化率と逆相関していた。これらの結果は、正常顆粒球系造血におけるp15のメチル化機構と類似していた。GM-CSFとFBS非存在下で48hr培養後にGM-CSFを再添加する系に、5-aza-2'-deoxycytidine(5-Aza)10^<-6>MあるいはTrichostatin A(TSA)10^<-6>Mを同時に加えるとメチル化率は部分的に抑制された。5-AzaとTSAの両者を同時に添加すると、メチル化は完全に消失した。これらのことから、GM-CSFはDNMTとHDACの単独或いは両者を用いてメチル化を誘導することが明らかとなった。MO7e細胞をmediumで72hr starvation,24hr5-Aza+TSA処理するとp15のメチル化はすべて非メチル化になった。そこでGM-CSFがde novo methylationを誘導できるかどうかを検討した。すべてp15の非メチル化となった細胞にGM-CSFで添加すると半分近くのalleleがメチル化を起こした。このことからGM-CSFはde novoメチル化誘導能を有する判明した。
これらの結果から、1)MO7e細胞はGM-CSFによるp15遺伝子のメチル化を検討するのに有用であった。2)GM-CSFはDNMTとHDACを単独あるいは両者を用いてde novoメチル化を誘導することが明らかとなった。
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[Journal Article] Methylation status of the p15 and p16 genes in paediatric myelodysplastic syndrome and juvenile myelomonocytic leukaemia.2005
Author(s)
Hasegawa D, Manabe A, Kubota T, Kawasaki H, Hirose I, Ohtsuka Y, Tsuruta T, Ebihara Y, Goto Y, Zhao XY, Sakashita K, Koike K, Isomura M, Kojima S, Hoshika A, Tsuji K, Nakahata T
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Journal Title
Br J Haematol 128
Pages: 805-812
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[Journal Article] Genetic subtypes of familial hemophagocytic lymphohistiocytosis : correlations with clinical features and cytotoxic T lymphocyte/natural killer cell functions.2005
Author(s)
Ishii E, Ueda I, Shirakawa R, Yamamoto K, Horiuchi H, Ohga S, Furuno K, Morimoto A, Imayoshi M, Ogata Y, Zaitsu M, Sako M, Koike K. Sakata A, Takada H, Hara T, Imashuku S, Sasazuki T, Yasukawa M.
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Journal Title
Blood 105
Pages: 3442-3448
