細胞培養上清のProterme解析による尿路性器癌腫瘍マーカーの同定

2005 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 17390439
• Research Institution: Kyoto University
• Principal Investigator: 中村 英二郎 京都大学, 医学研究科, 助手 (90293878)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 小川 修 京都大学, 医学研究科, 教授 (90260611) ; 賀本 敏行 京都大学, 医学研究科, 助教授 (00281098) ; 西山 博之 京都大学, 医学研究科, 講師 (20324642) ; 高橋 毅 京都大学, 医学研究科, 助手 (30362487)
• Keywords: プロテオミクス / Clusterin / 腎細胞癌 / EGLN3 / 副腎褐色細胞腫 / 細胞培養上清

Research Abstract

pVHL(-)腎癌細胞株にWt-VHLを導入、Mockを導入した細胞株との培養上清蛋白質の比較解析を行ったところ、pVHL(+)細胞でclusterinの過剰産生を認めた。同蛋白質はmRNAレベルでpVHLに制御されておりLuciferase Assayの結果、プロモーター領域のAP-1結合配列がResponsible Elementであった。Gelshift AssayではJUN protein familyの一つであるJUNBのpVHL(-)細胞核内での特異的な増加を認め、PC12細胞に同蛋白質を強制発現させたところAnti-apoptotic effectを示した。副腎褐色細胞腫のみを発症する亜型(Type2C)のVHL病家系に認められるL188V mutantにおいてpVHLの標的蛋白、HIF-alpha分解能が保持されているのに比してJUNBが制御されてないことからもJUNBの過剰発現が副腎褐色細胞腫の成因であると考えられた。VHL病以外にもMEN Type2、神経線維腫症1型で家族性に褐色細胞腫を発症する。これらは、RET、NF1の遺伝子変異を原因とするが両者の遺伝子産物の下流にも、やはりJUNBが位置することが知られている。近年、新たに家族性褐色細胞腫の原因遺伝子として同定されたsuccinate dehydrogenase gene(SDHD、SDHB)遺伝子産物がJUNBの下流にあるEGLN3の活性を制御していることも判明しており、既知の家族性褐色細胞腫が全て共通の細胞内シグナル伝達経路の異常により発症することが明らかとなった。また、SDHの変異は腎細胞癌を来すことも知られており、上記のシグナル伝達経路が悪性褐色細胞腫の成因に関与している可能性も高く、今後、治療の標的分子となりうる可能性も示唆された。

Research Products

• [Journal Article] Clusterin is a Secreted Marker for a HIF-independent Function of the VHL Tumor Suppressor Protein. (2006)
  • Author(s): Nakamura E, Abreu-e-Lima P, Awakura Y, Inoue T, Kamoto T, Ogawa O, Kotani H, Manabe T, Zhang GJ, Kondo K, Nose V, Kaelin WG Jr.
  • Journal Title: Am J Pathol 168(2): Pages: 574-584
• [Journal Article] Neuronal Apoptosis linked to EglN3 Proly1 Hydroxylase and Familial Pheochromocytoma Genes : Developmental Culling and Cancer. (2006)
  • Author(s): S Lee^*, E Nakamura^*, H Yang, W Wei, MS Linggi, MP.Sajan, RV Farese, Rs Freeman, BD Carter, WG Kaelin, S Schlisio
  • Journal Title: Cancer Cell 8 Pages: 155-167
• [Journal Article] Antiandrogen bicalutamide promotes tumor growth in a novel androgen dependent prostate cancer xenograft model derived from a bicalutamide treated patient. (2005)
  • Author(s): T.Yoshida, H.Kinoshita, T.Segawa, E.Nakamura, T.Inoue, Y.Shimizu, T.Kamoto, O.Ogawa
  • Journal Title: Cancer Res. 65(21) Pages: 9611-9616
• [Journal Article] Multiple roles of Rbx1 in the VBC-Cul2 ubiquitin ligase complex. (2005)
  • Author(s): Megumi Y, Miyauchi Y, Sakurai H, Nobeyama H, Lorick K, Nakamura E, Chiba T, Tanaka K, Weissman AM, Kirisako T, Ogawa O, Iwai K
  • Journal Title: Genes Cells 10(7) Pages: 679-691
• [Journal Article] Monthly paclitaxel and carboplatin with oral estramustine phosphate in patients with hormone refractory prostate cancer. (2005)
  • Author(s): T Segawa, T Kamoto, E Nakamura, O Ogawa
  • Journal Title: Int J Clin.Oncology 10: Pages: 333-337
• [Journal Article] The expression of NOV and WT1 in renal cell carcinoma : a quantitative reverse transcriptase-polymerase chain reaction analysis. (2005)
  • Author(s): Niu Z, Ito M, Awakura Y, Takahashi T, Nakamura E, Ito N, Ogawa O.
  • Journal Title: J Urol 174: Pages: 1460-1462