2006 Fiscal Year Annual Research Report
減数分裂と初期発生におけるDNA複製開始のライセンス付与と剥奪の分子機構
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17570157
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| Research Institution | Tokyo Institute of Technology |
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Principal Investigator |
立花 和則 東京工業大学, 大学院生命理工学研究科, 助手 (60212031)
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| Keywords | DNA複製 / ライセンス / 減数分裂 / 受精 / Mcm / Cdc6 |
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| Research Abstract |
ゲノムの正常な複製と維持のために必要なMcmのアンローディングに関して、第一に検討すべきはそのローディングに必須な因子であるCdc6であった。そこで、本研究では、第一にCdc6がMcmのアンロードに関わるのかどうかであり、そのためには、いったんMcmをローディングしたあとにCdc6をクロマチンに導入することを阻止し、Cdc6がMcmをローディングしてクロマチンを離れたあとに、抗Cdc6抗体を卵に注射し、Mcmのアンロードが起こるかどうかを観察した。この実験のためにCdc6が減数分裂中にタンパク質が合成されてDNA複製開始に機能しているとみられるため、その発現を、モルフォリノオリゴヌクレオチド(MO-Cdc6)をもちいて特異的に阻害することにより、Cdc6のノックダウンを試みた。MO-Cdc6をもちいたノックダウンの結果、Cdc6蛋白質の量はコントロールの1/10以下の量にまで減少させることができたが、クロマチン上に存在するCdc6のタンパク質量やDNA複製の開始にまったく影響は見られなかった.しかし、Mcm蛋白質複合体のクロマチンへの導入はコントロールの1/3から5の量に減少した.このことはクロマチン上にない、すなわち核質の部分にある、Cdc6がDNA複製を正常に行える以上の量のMcm蛋白質をクロマチンに導入するために必要であると示唆している.
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Research Products
(2 results)
