ムチン型糖鎖合成酵素遺伝子改変マウスによる白血球におけるムチン型糖鎖の機能解析

2007 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 17590236
• Research Institution: University of Tsukuba
• Principal Investigator: 工藤 崇 University of Tsukuba, 大学院・人間総合科学研究科, 准教授 (20288062)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 高橋 智 筑波大学, 大学院・人間総合科学研究科, 教授 (50271896)
• Keywords: 糖転移酵素 / ムチン型糖鎖 / ノックアウトマウス / ガラクトース転移酵素

Research Abstract

Core1β1,3-ガラクトース転移酵素(C1Gal-T)およびCore1β1,3-ガラクトース転移酵素特異的シャペロン(cosmc)遺伝子のC57BL/6J由来の組換えES細胞を作製およびそれから由来する個体を得ることに成功した。受精卵で発現するAyu1-Creマウスと交配により、ヌルアレルをもつマウスを作製し、完全欠損マウスを作製した結果、C1Gal-T完全欠損マウスは胎生致死であることがわかった。また、cosmc遺伝子は、X染色体上に存在するために、まずメスヘテロマウスを作製した。そのメスヘテロマウスとC57BL/6Jオスマウスとの交配の結果、-/Yのオスマウスは、今のところ生まれてこなかった(現在3腹)。以上のことから、ムチン型糖鎖は、正常な発生に重要な働きをしていることが明らかになった。現在、どの段階で致死になるかを確認中である。白血球におけるムチン型糖鎖の役割を解析するための血球細胞へ薬剤誘導可能なCreマウス、Mx1-Creとの交配中である。合成ペプチドによるC1Gal-Tに対するポリクローナル抗体の作製に成功した。この抗体で、膵臓を染色したところランゲルハンス氏島のほとんどの細胞に陽性像が得られたことから、インスリンプロモーターをもつinsulin-Creマウスと交配して、β細胞特異的なコンディショナルノックアウトマウスを作製した。現在、病理的解析が進行中である。