2005 Fiscal Year Annual Research Report
細胞分化に伴うマウスGATA-1遺伝子発現の量的制御機構の解明
| Project/Area Number |
17590237
|
|---|
| Research Institution | University of Tsukuba |
|---|
Principal Investigator |
大根田 絹子 筑波大学, 大学院・人間総合科学研究科, 講師 (50323291)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
大根田 修 筑波大学, 大学院・人間総合科学研究科, 教授 (30311872)
|
|---|
| Keywords | 転写因子 / 赤血球 / 遺伝子発現制御 / トランスジェニックマウス / 大腸菌人工染色体 |
|---|
| Research Abstract |
1.GATA-1BAC GFPマウスにおけるレポーターの発現解析
マウスGata1遺伝子座を含むマウス大腸菌人工染色体(BAC)クローンを材料として、相同組み換えによって翻訳開始点にGFPまたはLuciferase cDNAを挿入した組み換えBACを作成し、トランスジェニック(TG)マウスを作成した。樹立したGATA-1BAC GFP TGマウスの赤血球におけるGFP発現量はBACの挿入コピー数に依存していた。すなわち、GATA-1BAC GFP TGマウスは位置効果の影響を受けにくい状態でレポーターの発現強度を定量的に解析できるマウスであることが示唆された。また、マウスGata1遺伝子の約8.5kbpの領域を用いたGFPマウスに比較して未分化な赤芽球での発現をより効率よく再現していることが示唆された。
2.血球特異的発現に必要なコア・シスエレメントを欠失させたGFP BACトランスジェニックマウスの作成
マウスGata1遺伝子における血球系エンハンサー(HE)を欠失させた、GATA-1BAC GFP(delta G1HE)を用いてTGマウスを作成した。GFPの発現は赤芽球前駆細胞のうち分化の早い時期では全く消失しており、分化が進んだ細胞集団のGFP強度が低下していた。これらの結果からHEの機能的貢献が細胞の分化段階によって異なっていることが示唆された。
3.組織特異的プロモーター選択によるGATA-1発現の量的制御に関する解析
マウスGata1遺伝子における精巣セルトリ細胞特異的なシス領域(TAR)を欠失させた、GATA-1BAC GFP(delta G1TAR)を用いてTGマウスを作成したが、精巣でのレポーター発現低下はみられず、赤血球への発現への影響もみられなかった。
|
-
[Journal Article] Graded levels of GATA-1 expression modulate survival, proliferation, and differentiation of erythroid progenitors.2005
Author(s)
Pan X, Ohneda O, Ohneda K, Lindeboom F, Iwata F, Shimizu R, Nagano M, Suwabe N, Philipsen S, Lim KC, Engel JD, Yamamoto M.
-
Journal Title
J Biol Chem 280
Pages: 22385-22394
-
-
[Journal Article] Transgenic over-expression of GATA-1 mutant lacking N-finger domain causes hemolytic syndrome in mouse erythroid cells.2005
Author(s)
Nakano M, Ohneda K, Yamamoto-Mukai H, Shimizu R, Ohneda O, Ohmura S, Suzuki M, Tsukamoto S, Yanagawa T, Yoshida H, Takakuwa Y, Yamamoto M.
-
Journal Title
Genes Cells. 10
Pages: 47-62
-
[Journal Article] Essential role of synoviolin in embryogenesis.2005
Author(s)
Yagishita N, Ohneda K, Amano T, Yamasaki S, Sugiura A, Tsuchimochi K, Shin H, Kawahara K, Ohneda O, Ohta T, Tanaka S, Yamamoto M, Maruyama I, Nishioka K, Fukamizau A, Nakajima T.
-
Journal Title
J Biol Chem. 280
Pages: 7909-7916
-
