2007 Fiscal Year Annual Research Report
リン脂質合成酵素の転写を制御する新規転写因子の同定と細肪周期における役割の解明
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17590265
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| Research Institution | Dokkyo Medical University |
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Principal Investigator |
杉本 博之 Dokkyo Medical University, 医学部, 教授 (00235897)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
佐藤 元康 獨協医科大学, 医学部, 助教 (20418891)
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| Keywords | CTP:Phosahocholine Cytidylyltransferase / ホスファチジルコリン / Ets / CTP:Phosphoethanolamine Cytidylyltransferase / ホスファチジルエタノールアミン / RAW264 / M-CSF / PKC |
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| Research Abstract |
ホスファチジルコリン(PC)合成の律速酵素であるCTP:Phospholine Cytidylyltransferaseα(CTα)のプロモーター解析を行い、CTαの転写活性はSp1およびEtsファミリー転写因子の中でもEts1やEts2により促進され、Netにより抑制されることを見出した。生理学的には、マクロファージRAW264細胞におけるM-CSF刺激によるCTα転写の促進は、活性化されたPKCにより誘導されたEts2によることが示唆された。
新たな研究テーマとしてPCとともに生体膜の主要な構成分子であるホスファチジルエタノールアミン(PE)の合成スピードを調節する機構解析のため、PE合成の律速酵素であるCTP:Phosphcethanolamine Cytidylyltransferase(ET)の転写制御機構に注目し研究を進めた。培養細胞を用いた研究から、 ETの転写は培養条件により増減することが明らかになった。どのような因子によりETの転写が制卸されるのか、その因子の同定を試みている。またどのような転写制御によりETのmRNA量が変化するのかを明らかにするため、ETのプロモーター領域をNIH3T3細胞のゲノムからクローニングし、種々の長さの欠損プロモーターを作成し、レポータープラスミドに組み込み、ルシフェラーゼ活性を測定し転写に重要な領域の同定を試みた。その結果-40から-140領域の間に転写に重要な領域が存在することが明らかになり、現在Gel-shift法などにより詳細を解析している。
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