2006 Fiscal Year Annual Research Report

寄生虫ミトコンドリアに見られる、縮小化した機能性RNAを持つ翻訳系の解析

Research Project

Project/Area Number	17590368
Research Institution	The University of Tokyo
Principal Investigator	渡邊洋一東京大学, 大学院医学系研究科, 助教授 (90323568)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	大槻高史岡山大学, 工学部, 講師 (80321735)
Keywords	寄生性線虫 / ミトコンドリア / タンパク質合成 / 機能性RNA / リボソーム / tRNA / EF-Tu / 線虫
Research Abstract	多細胞動物のミトコンドリアのタンパク質合成系は、様々な点で真核生物の細胞質や原核生物のタンパク質合成系とは異なる特徴を持つ事が明らかになってきた。その中で、線形動物ミトコンドリアのタンパク質合成系は、多細胞生物の中で最短のtRNAセットと最小クラスのリボソームRNAを持つ事が、その遺伝子配列から予測されていた。そこで、タンパク質合成系の機能性RNAが縮小化した際、どのような影響が生じるのかという点が明らかにするため、われわれは寄生性線虫および自由性生活性線虫のミトコンドリアタンパク質合成系を解析してきた。本年度の主な成果は以下のとおりである。 1.細胞内に微量しか存在しないミトコンドリアリボソームを効率よく、高純度に調製するために、タグ付きミトコンドリアリボソームタンパク質を発現する組換え線虫を作製した。この線虫内ではタグつきタンパク質がミトコンドリアに移行し、リボソームに取り込まれていることが示唆された。しかし、用いたタグ配列を目標としたアフィニティ精製では高純度のリボソームを得ることができなかったため、複数種のタンパク質とタグ配列の組み合わせを検討する必要があることがわかった。 2.エノプレア綱寄生性線虫である旋毛虫ミトコンドリアには、他のクロマドレア綱線虫ミトコンドリアに存在するTアーム欠失型tRNA、Dアーム欠失型tRNA以外に、クロマドレア綱線虫ミトコンドリアには存在しないクローバーリーフ型tRNAが存在することが予想されていた。そこでわれわれは旋毛虫ミトコンドリアEF-Tuをクローニングし、そのアミノアシルtRNAに対する結合能を明らかにした。