2005 Fiscal Year Annual Research Report
EBウイルス依存性に発現変化する細胞遺伝子群の網羅的解析
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17590418
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| Research Institution | Kochi University |
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Principal Investigator |
今井 章介 高知大学, 医学部, 教授 (60232592)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
黒田 正幸 高知大学, 医学部, 助手 (00253005)
松本 健治 国立成育医療研究センター研究所, 免疫アレルギー研究部, 室長 (60181765)
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| Keywords | EBウイルス / 発癌責任遺伝子 / マイクロアレイ / 上皮細胞 / T / NK細胞 |
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| Research Abstract |
EBV感染細胞から迅速かつ効率的にEBVゲノムを駆逐するユニークなシステムと、GeneChipマイクロアレイ解析法を活用することにより、EBV(EBV遺伝子)によって発現が変化する上皮細胞、ならびにT/NK細胞遺伝子群の網羅的探索、特定を目指した解析を実施し、本年度に以下のような成果を得た。
1)最近、申請者らが独自に開発した効率的なEBV駆逐分子dominant-negative EBNA1(DNE1; Mol.Ther., 11(4):578-90,2005)をアデノウイルスベクター(5型ベクター、ファイバー置換5型ベクター)を用いてEBV陽性の上咽頭癌細胞株およびT/NK腫瘍細胞株に導入発現させたところ、3〜6日目に細胞集団の60〜90%でEBVゲノムの脱落をウェスタンブロット、real-time PCR、EBER1 in situ hybridization法などにて確認した。
2)WST-1アッセイ、軟寒天培地中のコロニー形成能を指標に検討したところ、DNE1導入細胞ではEBVゲノム脱落に一致して、有意な増殖能の低下を認めた。
現在、これらEBVゲノム脱落細胞とEBV陽性の親細胞をもとに、GeneChipマイクロアレイ解析を開始、きわめて知見に乏しかった非B細胞性腫瘍の成因に果たすEBVの機能とその分子メカニズムの解明作業が進行している。さらに、テトラサイクリンによる遺伝子発現制御法にて全細胞で一斉にDNE1発現を誘導する解析系も並行して構築中であり、これを利用して、より明確な差異を出すことを試みている。
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Research Products
(14 results)
