2006 Fiscal Year Annual Research Report
形質細胞分化にともなうケモカイン受容体CCR10発現の転写制御機構
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17590443
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| Research Institution | Kinki Univeristy |
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Principal Investigator |
義江 修 近畿大学, 医学部, 教授 (10166910)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
稗島 州雄 近畿大学, 医学部, 講師 (10322570)
中山 隆志 近畿大学, 医学部, 講師 (60319663)
長久保 大輔 近畿大学, 医学部, 助手 (10368293)
白川 愛子 近畿大学, 医学部, 助手 (30260285)
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| Keywords | 形質細胞 / CCR10 / 粘膜免疫 / 転写因子 / IL-21 / ビタミンD / Ets-1 / ビタミンDレセプター |
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| Research Abstract |
抗IgM抗体と抗CD40抗体による共刺激で活性化したヒト末梢血B細胞をIL-21の存在下で数日間培養すると形質細胞へと分化することが報告された。そこでこの分化系を用いて形質細胞分化にともなうCCR10の発現誘導を検討した。その結果、活性化B細胞をIL-21存在下で培養するとCD38陽性の形質細胞の著明な増加が確認された。しかしながら、新たに分化した形質細胞ではCCR10の発現は誘導されなかった。一方、活性型ビタミンD3(VD3)はアジュバントとして抗原とともに投与すると、粘膜免疫を誘導することが知られている。そこでVD3をこの培養系に加えてみた。その結果、CCR10の発現が誘導された。また各種のB細胞株では、EBV不死化B細胞や形質細胞株などのようなCCR10発現細胞でビタミンD3受容体の選択的な発現が確認された。そこでVD3によるCCR10発現誘導を転写レベルで確認するため、CCR10の開始コドンから上流-1500bpまでをクローニングし、レポータープラスミドpGL3に挿入した。そしてCCR10を発現しているヒト骨髄腫細胞株に導入し、レポーターアッセイを行った。その結果、-71〜-62bpの領域に存在するEts-1認識配列がCCR10の発現誘導に基本的に重要であることが示された。そしてEts-1タンパク質の特異的結合を確認した。さらに-124〜-110bpにVD3応答サイトと見なしえる配列を見出し、そこに点変異を導入することによりVD3に対する反応性の消失を確認した。そしてVD3レセプターのVD3依存的結合を確認した。VD3が粘膜免疫を誘導・増強するメカニズムのひとつとして形質細胞でのCCR10発現誘導が関与することが示唆された。
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