2005 Fiscal Year Annual Research Report
血小板反応性の個体差に関わる分子基盤およびその至適検査マーカーの探究
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17590482
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| Research Institution | Hirosaki University |
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Principal Investigator |
庄司 優 弘前大学, 医学部, 助教授 (10226300)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
保嶋 実 弘前大学, 医学部, 教授 (90142934)
杉本 一博 弘前大学, 医学部附属病院, 講師 (70271799)
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| Keywords | 遺伝子 / シグナル伝達 / 生体分子 / バゾプレシンV1a受容体 / マイクロアレイ / 質量分析 |
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| Research Abstract |
バソプレシン(AVP)に対する血小板反応性の個体差に関わる分子基盤を明らかにするため以下の検討を行った。健常成人22名を対象とし、血小板凝集計を用いて陽性凝集惹起物質ADPにもAVPにも正常反応を示した者を反応群とし、陽性凝集惹起物質には正常反応を示しAVPには低反応を示した者を低反応群とした。性年令の一致した反応例と低反応例のペアーを抽出し、約100mLの採血を行った。QIAamp RNA Blood mini Kitを用いてRNAを抽出、Amino Allyl MessageAmp TM aRNA kitを用いてアミノアリルラベルaRNAを調整し、Hitachi Ace-Gene上でハイブリダイゼーションさせ遺伝子発現の差を検出した。反応群と低反応群との間で2倍以上あるいは1/2以下のシグナル比の認められた遺伝子を選択した。その結果、反応例においては、sodium channel, voltage-gated, type XI, alpha、mannose-P-dolichol utilization defect 1、eukaryotic translation termination factor 1、cysteine and glycine-rich protein 2、general transcription factor IIH, polypeptide 2, 44kDa等の遺伝子発現が増強していた。低反応例では、component of oligomeric golgi complex 6、Hermansky-Pudlak syndrome 3、FERM domain containing 1、adenosine monophosphate deaminase 2(isoform L)、nudix-type motif 1、cell growth regulator with ring finger domain 1等の遺伝子発現が増強していた。さらに、質量分析を行い、反応例では、protease serine 4 isoform B、keratin 1b、trypsinファミリーが、低反応例では、TPMsk1、TPM3 protein、YWHAZ protein等の特異的発現を認めた。同時に、血小板のAVP受容体AVPV1A遺伝子の多型を探索し、-242の単塩基多型が遺伝子発現と関連することを見い出した。
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