2007 Fiscal Year Annual Research Report
遺伝子導入骨髄幹細胞移植を用いた新たな炎症性腸疾患治療法開発の基礎検討
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17590633
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| Research Institution | Shiga University of Medical Science |
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Principal Investigator |
藤山 佳秀 Shiga University of Medical Science, 医学部, 教授 (70111896)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
安藤 朗 滋賀医科大学, 医学部, 講師 (90252395)
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| Keywords | 骨髄移植 / 組織再生 |
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| Research Abstract |
骨髄由来多能性幹細胞が大腸筋線維芽細胞に分化することを証明するために,まず,マウスの骨髄移植の実験系を立ち上げた。Male C57B1/6マウスの大腿骨より骨髄細胞を得,これを放射線全身照射したFemaleマウスに尾静脈より移植する。移植した骨髄は,CD34陽性細胞をFACSにてcell sorterにて濃縮したうえで移植した。骨髄の定着は、脾臓実質および骨髄細胞の軟寒天培養系にお融るコロニー形成能と末梢血中の白血球の上昇で確認した。このマウス移植系において,骨髄が定着したと確認できた後,経時的にマウスを屠殺して組織学的検討を加えた。この系での骨髄細胞由来の筋線維芽細胞の証明は性染色体のY染色体をin situ hybridization法にて検索する。さらに,筋線維芽細胞マーカーとしてα-smooth muscle actin(αSMA)を免疫染色してY染色体との2重染色にて判定した。今回の検討では、移植骨髄の腸管への定着は上皮下の間質細胞に認められた。しかし,上皮細胞への分化は認められず,骨髄細胞の組織再生への貢献度についてさらなる解析が必要である。
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