2005 Fiscal Year Annual Research Report
血管病変部の緊張異常と増殖性亢進におけるプロテイナーゼ活性化型受容体の役割
| Project/Area Number |
17590744
|
|---|
| Research Institution | Kyushu University |
|---|
Principal Investigator |
平野 勝也 九州大学, 大学院・医学研究院, 講師 (80291516)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
平野 真弓 九州大学, 大学院・医学研究院, 助手 (80336031)
|
|---|
| Keywords | 血管 / 受容体 / 平滑筋 / トロンビン / プロテアーゼ / 血管トーヌス / 増殖 / シグナル伝達 |
|---|
| Research Abstract |
トロンビンは内皮依存性血管弛緩反応を引き起こす。この弛緩作用にはプロテイナーゼ活性化型受容体(PAR)の1型と4型が関与する。PAR-1活性化に引き続く、細胞内シグナル伝達は詳しく研究されているのに対し、PAR-4の活性化に続くシグナル伝達については未だ不明な点が多い。シグナル伝達に関与するGタンパク質についての情報も限られている。本研究では、培養ウシ大動脈内皮細胞を用いて、ジアミノローダミン-4MおよびFura-2蛍光測定を行い、それぞれ、内皮細胞のNO産生と細胞質Ca^<2+>濃度変化を評価した。トロンビンおよびPAR-4活性化ペプチド(AYPGKF-NH_2)で細胞を刺激すると、細胞質Ca^<2+>濃度上昇を伴わずに、NOが産生された。このNO産生は、百日咳毒素処理によりほぼ半減したが、Ca^<2+>キレート剤BAPTAを細胞内に負荷しても影響を受けなかった。一方、Ca^<2+>イオノフォアであるイオノマイシンで内皮細胞を刺激すると、細胞質Ca^<2+>濃度上昇を伴い、NO産生が認められた。このNO産生は、BAPTAの負荷により消失したが、百日咳毒素に対しては抵抗性であった。本研究より、PAR-4の活性化は、細胞内カルシウムシグナルにはほとんど依存せずにNO産生を引き起こし、このNO産生のGi/oタンパク質が関与することが初めて明らかになった。また、PAR-4活性化からNO産生に至るシグナル伝達経路には、Gi/oが依存しない経路の関与があることも示唆された。
|
