2005 Fiscal Year Annual Research Report
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17590999
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| Research Institution | Yamaguchi University |
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Principal Investigator |
石川 秀明 山口大学, 大学院・医学系研究科, 助教授 (40294623)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
河野 道生 山口大学, 大学院・医学系研究科, 教授 (40161343)
小幡 雅則 山口大学, 医学部, 講師 (80158831)
津山 尚宏 山口大学, 大学院・医学系研究科, 助手 (10335747)
水上 洋一 山口大学, 総合科学実験センター, 助教授 (80274158)
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| Keywords | 骨髄腫 / IL-6 / Lyn / CD45 / 刺激伝達分子 / 質量分析 / マイクロアレイ / IL-6誘導遺伝子 |
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| Research Abstract |
ヒト骨髄腫細胞は、分化度の異なる不均一な腫瘍細胞集団であり、その中で未熟骨髄腫細胞が増殖因子であるIL-6に反応して増殖している。未熟骨髄腫細胞はCD45抗原の有無により二つの細胞集団に分けられ、CD45陽性の細胞が増殖集団である。骨髄腫細胞の増殖にはIL-6によって活性化されるSTAT3とErk1/2に加えて、CD45の発現とsrc型チロシン・キナーゼ、Lynの活性が必須である。
IL-6依存性骨髄腫細胞株にLynを過剰発現させると、IL-6添加時の細胞増殖のみならずIL-6除去時の細胞死も促進されることがわかった。CD45を発現する骨髄腫細胞がsrc型PTKの活性化を介して酸化ストレスに感受性が高まっていることから、Lynが骨髄腫細胞のIL-6依存性を規定している可能性が示唆される。既に(His)_6でtag化したCD45、Lyn、IL-6Rαを過剰発現する骨髄腫細胞株を樹立しており、IL-6刺激後にこれらの分子と会合する分子群をNi beadsで回収し、質量分析法により同定する予定である。これらの分子の中にはCD45 PTPの生理的基質やLynの下流で活性化される刺激伝達分子群が含まれていると予想される。
一方で現在、骨髄腫細胞におけるIL-6応答刺激伝達分子群の網羅的解析を行っており、IL-6処理後に脂質ラフトに存在する分子、チロシンりん酸化される分子、脂質ラフト外でチロシン脱りん酸化される分子を質量分析法により既に同定済みである。今後これらの分子のIL-6刺激前後の細胞内局在およびチロシンりん酸化を確認する予定である。
また、IL-6依存性骨髄腫細胞株を用いて、DNAマイクロアレイによるIL-6刺激後の遺伝子発現の経時的解析を行ったところ、早期には多くのSTAT3標的遺伝子、遅れていくつかのNF-κB標的遺伝子の発現が認められ、IL-6誘導遺伝子の中で新たにBcl-6遺伝子の重要性を明らかにした。それ以外にもIL-6によって発現が変化する遺伝子を多数同定しているので、Bcl-6の標的遺伝子も含めて、さらにIL-6刺激後の細胞増殖を担う遺伝子発現カスケードを明らかにしていきたい。
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Research Products
(5 results)
