ティッシュエンジニアリングを応用した組織再構築型人工食道の開発

2007 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 17591440
• Research Institution: Tokyo Dental College
• Principal Investigator: 安藤 暢敏 Tokyo Dental College, 歯学部, 教授 (90101972)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 佐藤 道夫 東京歯科大学, 歯学部, 講師 (50215852) ; 小川 信二 東京歯科大学, 歯学部, 講師 (80224103) ; 原田 裕久 東京歯科大学, 歯学部, 講師 (70265841) ; 青木 成史 東京歯科大学, 歯学部, 助教 (50296589)
• Keywords: 移植 / 再生医学 / 細胞培養 / バイオテクノロジー

Research Abstract

1.ラット食道上皮細胞の分離培養法の検討 1)ドナーラットを儀死させて食道を採取し、酵素処理法(ディスパーゼ1000u/mlおよび2.25%トリプシン)を応用して食道上皮細胞をsingle cellとして回収することに成功した。 2)つづいて3T3細胞培養法を応用して、食道上皮細胞を培養増殖することが可能になった。 3)さらに豚腱由来の0.3% type Iコラーゲンゲル上で上記の方法でprimary cultureを行った食道上皮細胞を培養し、移植可能な培養細胞シートを作製することに成功した。
2.組織再構築型人工食道による頚部食道の置換実験 1)現在、組織再構築型人工食道と頚部食道の置換実験を検討中である。移植6日目までラットは生存し、人工食道と生体の食道の連続性が確認された。
3.ヒト食道上皮細胞の分離培養とヌードマウスへの移植 1)食道癌切除標本より正常食道粘膜を採取して、食道上皮細胞を上記方法にて分離培養をおこなった。ラットと同様の方法を用いて、ヒト食道上皮細胞をsingle cellとしての分離が可能であった。 2)臨床応用可能とするため、ヒト食道上皮細胞は無血清培地を用いて培養した。ヒト食道上皮細胞によるシートの作製が可能であった。 3)シートをヌードマウスの広背筋上に移植し組織学的な変化を観察したところ、移植3週目にはヒト食道に類似した組織像が確認された。 以上の実験結果より、ヒトの正常食道組織より回収した上皮細胞を利用して新生食道が再構築できる可能性が示唆された。さらに、ラットの実験結果より食道切除後の再建臓器として組織再構築型人工食道が臨床応用できる可能性が示唆された。