2005 Fiscal Year Annual Research Report
超活性型成熟樹状細胞誘導法の確立と誘導細胞を用いた癌ワクチン免疫療法の臨床応用
| Project/Area Number |
17591475
|
|---|
| Research Institution | Kagawa University |
|---|
Principal Investigator |
紺谷 桂一 香川大学, 医学部附属病院, 講師 (90314153)
|
|---|
| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
木原 実 香川大学, 医学部附属病院, 助手 (50322269)
横見瀬 裕保 香川大学, 医学部, 教授 (80231728)
山内 清明 香川大学, 医学部, 教授 (00291427)
黄 政龍 香川大学, 医学部, 助教授 (10271511)
|
|---|
| Keywords | 外科 / 癌免疫療法 / 樹状制帽 / 細胞ワクチン / 乳癌・肺癌 |
|---|
| Research Abstract |
インフォームドコンセントの得られたHLA-A2あるいは24陽性転移再発肺癌患者あるいは健常人末梢血より、濃度勾配遠心分離法を用いて末梢血単核球を分離した。分離単核球を2%ヒトAB血清含AIM-V培養液3mlに懸濁し培養プレート内で2時間静置した。浮遊細胞を除去しプレート付着細胞を単球分画とした。単球付着プレートに3mlのGM-CSF (50ng/ml)/IL-4(50ng/ml)添加培養液を加え6日間培養した。誘導された未熟樹状細胞をOK432(0.1KE/ml)、TNFα(1,000U/ml)、LPS(20ng/ml)あるいは抗CD40抗体(2.5μg/ml)のいずれかを添加した2%ヒトAB血清含AIM-V培養液に浮遊させ、成熟樹状細胞を得るために2日間培養した。細胞を抗ヒトCD80、CD83、CD86、HLAclassII抗体を用いて染色し細胞表面分子発現をフローサイトメトリー法にて解析した。抗CD40抗体単独添加細胞群ではCD80とCD83発現が著明に増加した。OK432単独添加細胞群ではCD86とHLAclassII分子発現が著明に増加した。TNFαのこれら分子に対する発現増強効果はほとんど認められなかった。LPS単独添加細胞群では4分子のごく軽度の発現増加が認められた。またOK432と抗CD40抗体を混合添加することによって、4分子いずれも最も強い発現増加が得られた。平行して健常人末梢血単球より同様の方法で成熟樹状細胞を誘導しその表面マーカーを解析したが、肺癌患者由来樹状細胞のものと同じ結果が得られた。
|
