2005 Fiscal Year Annual Research Report
Project/Area Number |
17591541
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Research Institution | Fukuoka University |
Principal Investigator |
阪元 政三郎 福岡大学, 医学部, 助手 (60258548)
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Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
福島 武雄 福岡大学, 医学部, 教授 (10078735)
継 仁 福岡大学, 医学部, 講師 (80279273)
小松 文成 福岡大学, 医学部, 助手 (70412591)
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Keywords | 再生医療 / 分化転換 / nestin / neurosphere法 / liver / mouse |
Research Abstract |
我々は、再生能の強い臓器のひとつである肝臓内の多能性幹細胞を用いて神経細胞へと分化させ中枢神経系の機能を再生させることを目標にin vitroにて基礎実験を行ってきた。これまでの実績としてmouse胎児肝組織由来の細胞より神経様の細胞への分化転換の結果を得ている。今回はadultにおいても同様に、肝由来の多能性細胞から神経系の細胞に分化転換させることを研究目標としている。 今回の研究により以下の結果が得られている。胎児同様、組織をsingle cell化させるためadult liverをコラゲナーゼ灌流法にて結合繊維を溶解させた上でピペッティングしsingle cellを採取した。採取した細胞はneurosphere法を用いて初代培養されたがsphereの形成は胎児組織の場合と比較し不良であった。また、このとき得られたsphereにおいて神経幹細胞のマーカーであるnestinで免疫染色を行ったが、陽性細胞はほとんどみられなかった。胎児肝組織をnestinにて免疫染色を行うと多数の陽性細胞が観察されるのに対し、adult liverのnestin免疫染色では陽性細胞はほとんど観察されなかった。このNestin陽性細胞の欠如がadult liverにおけるneurospher法での培養を困難としている原因と考えられた。このためadult liverのnestin陽性細胞を賦活、増殖させるための手段として再生肝モデルの作成を試みている。再生肝モデルはadult mouseのliverを約60%外科的に切除するものである。今後再生肝モデル作成し、再生肝より採取した細胞によるneurosphere法での培養を実践し、組織、細胞を免疫染色にて評価する予定としている。
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