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2006 Fiscal Year Annual Research Report

原虫に感染するウイルスの同定と次世代組換えワクチン開発への応用

Research Project

Project/Area Number 17658136
Research InstitutionObihiro University of Agriculture and Veterinary Medicine

Principal Investigator

玄 学南  帯広畜産大学, 原虫病研究センター, 教授 (10292096)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 井上 昇  帯広畜産大学, 原虫病研究センター, 助教授 (10271751)
高島 康弘  岐阜大学, 応用生物科学部, 助教授 (20333552)
Keywords原虫 / バベシア / Babesia gibsoni / ウイルス / cDNAライブラリー / ESTデータベース
Research Abstract

ウイルスは、動物・植物から細菌に至るまで地球上の殆どの生物に普遍的に認められている。近年、原虫(単細胞原生動物)にもいくつかのウイルス様粒子の観察例の報告はあるが、その正体はいまだに謎のまま残されている。そこで、本研究では原虫に感染するウイルスの正体の解明を目指す。本年度に実施した研究内容と得られた研究成果は以下の通りである。
1)cDNAライブラリーの構築:イヌバベシア原虫(Babesia gibsoni、NRCPD株)をビーグル犬に感染し、原虫感染率が約10%に上昇した時に、血液を採集した。白血球分画を除去したのちに、原虫感染赤血球よりAGPC法を用いてTotal RNAを調製した。その内5μgを使用しG-Capping法にてcDNAを合成し、pGCAPベクターに2本鎖cDNAがインサートされたプラスミドをフェノール抽出後エタノール沈殿により回収し、TEに溶解した。得られたプラスミド溶液をDH12Sコンピテント細胞と混合し、エレクトロポレーション法により形質転換を行い、寒天培地に蒔いて培養した。得られたcDNAライブラリーのサイズは約1x10^5個の形質転換体を含むものであった。
2)cDNAクローンの解析:上記完全長cDNAライブラリーからランダムに約10,000クローンを選択し、塩基配列を解読した。BLAST検索を行ったところ、1,257種類の遺伝子が同定された。得られたデータを基に、ESTデータベースを作成した。
3)推定ウイルス由来遺伝子の同定:相同性検索の結果、幾つかのウイルス由来遺伝子と推定されるクローンを同定でき、その解析を行ってきた。

  • Research Products

    (6 results)

All 2006

All Journal Article (6 results)

  • [Journal Article] Identification of a novel gene encoding a secreted antigen 1 of Babesia gibsoni and evaluation of its potential use in serodiagnosis.2006

    • Author(s)
      Jia et al.
    • Journal Title

      Am.J.Trop.Med.Hyg. 75・5

      Pages: 843-850

  • [Journal Article] Clinical usefulness of antibodies against Babesia gibsoni detected by ELISA with recombinant P50.2006

    • Author(s)
      Miyama et al.
    • Journal Title

      J.Vet.Med.Sci. 68・12

      Pages: 1371-1373

  • [Journal Article] A 38-kDa protein from Babesia gibsoni and its antibody response in an experimentally infected dog. Vet. Parasitol.2006

    • Author(s)
      Zhou et al.
    • Journal Title

      Vet.Parasitol. 141・3

      Pages: 345-348

  • [Journal Article] Babesia gibsoni : an apical membrane antigen-1 homologue and its antibody resnonse in the infected dogs.2006

    • Author(s)
      Zhou et al.
    • Journal Title

      Exp.Parasitol. 114・4

      Pages: 329-333

  • [Journal Article] A Babesia gibsoni thromospondin related anonymous protein (BgTRAP) is an immunodominant antigen involved in the erythrocyte invasion.2006

    • Author(s)
      Zhou et al.
    • Journal Title

      Mol.Biochem.Parasitol. 148・2

      Pages: 190-198

  • [Journal Article] Isolation and identification of an actin from Babesia gibsoni.2006

    • Author(s)
      Zhou et al.
    • Journal Title

      J.Parasitol. 92・1

      Pages: 208-210

URL: 

Published: 2008-05-08   Modified: 2016-04-21  

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