2005 Fiscal Year Annual Research Report
個体レベルでの細胞周期のリアルタイムイメージングの試み
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17659079
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| Research Institution | Hamamatsu University School of Medicine |
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Principal Investigator |
北川 雅敏 浜松医科大学, 医学部, 教授 (50294971)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
内田 千晴 浜松医科大学, 医学部, 助手 (60223567)
北川 恭子 浜松医科大学, 医学部, 助手 (20299605)
小田 敏明 浜松医科大学, 医学部, 助教授 (90126805)
服部 隆行 浜松医科大学, 医学部, COE研究員 (50377751)
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| Keywords | 細胞周期 / サイクリン / p27 |
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| Research Abstract |
[目的]本研究は細胞周期のリアルタイムイメージングを行うため、細胞周期特異的遺伝子であるp27^<Kip1>およびサイクリン遺伝子群に注目してその量的制御機構を解析する。さらにその知見を利用して細胞周期のリアルタイムイメージングを目指す。
[研究成果]本年度は、研究に用いるHCT116細胞、T98G細胞、HeLa細胞における、p27^<Kip1>、サイクリン遺伝子群、p53およびその分解に関与するユビキチンリガーゼSkp2、Pirh2の細胞周期における発現パターンを解析した。手法はノコダゾールによるM期同調、アフィディコリンによるG1/S同調、血清飢餓によるG0/G1同調(T98G細胞)を用い、それぞれ同調を解除し細胞周期を進行させ、経時的にサンプリングし、各タンパク質の発現をウエスタンブロットにより解析した。その結果、p27はG1期中期から減少し、サイクリンEが上昇、S期に開始と同時にサイクリンAおよびSkp2の発現が充進することがわかった。さらにG2/MでサイクリンBが急増した。これらの分子を追跡することで細胞周期のモニターが可能なことが判明した。
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