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2005 Fiscal Year Annual Research Report

難治性消化器癌患者血清中の自己抗体検出用プロテインチップの開発

Research Project

Project/Area Number 17659166
Research InstitutionYamaguchi University

Principal Investigator

蔵満 保宏  山口大学, 医学部, 助教授 (50281811)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 中村 和行  山口大学, 医学部, 教授 (90107748)
赤田 純子  山口大学, 医学部, 助手 (30346548)
Keywordsプロテオミクス / 肝細胞癌 / 自己抗体 / HSP70 / Mn-SOD / Peroxiredoxin / プロテインチップ / 質量分析
Research Abstract

我々はこれまでC型肝炎ウイルス(HCV)感染後に発癌(HCC)した患者(HCV-HCC)の癌部組織と非癌部組織のプロテオーム解析を行い報告してきた。しかしながら、腫瘍マーカーを目的とした患者血清中の特異的タンパク質の同定はできていない。そこで、腫瘍マーカーとして期待できる患者血清中の自己抗体検出を試みた。
B型肝炎ウイルス(HBV)もしくはHCV感染後に発癌した15例の患者からの癌切除手術の際に入手した癌部と非癌部の組織から抽出したタンパク質を二次元電気泳動で展開した後にPVDF膜に転写して、それぞれのHCC患者自身の血清、もしくは20例の健常者血清を用いてウェスタンブロットを行った結果、健常者血清に比べてHCC患者血清に強く認識されるタンパク質スポットが4スポット検出された。これら4スポットに対応するCBBR-250によって染色したゲル上のスポットをLC-MS/MSを用いた質量分析により同定した結果、Peroxiredoxin、HSP70.1、Mn-SODの3つが同定できた。質量分析結果の確認のためにリコンビナントタンパク質のPeroxiredoxin、HSP70.1、Mn-SODを用いて血清のウエスタンブロットを行ったところ、健常者血清に比べ有意にHCC患者血清中のPeroxiredoxin、HSP70.1、Mn-SODに対する自己抗体の増強が確認できた。さらに、HCC患者血清中のHSP70.1に対する自己抗体の抗体価を検証するために、血清を希釈してHSP70.1リコンビナントタンパク質に対してウエスタンブロットを行ったところ、1000倍希釈まで検出可能であることが明らかになった。現在これら3種類の自己抗体に認識される抗原タンパク質をダイヤモンド様コーティング金属基板に強固に貼付けたプロテインチップを開発中である。

  • Research Products

    (8 results)

All 2006 2005

All Journal Article (8 results)

  • [Journal Article] Proteomic analysis of autoantibodies in patients with hepatocellular carcinoma.2006

    • Author(s)
      Takashima, T.
    • Journal Title

      Proteomics (in press)

  • [Journal Article] Protein level of Apolipoprotein E increased in human hepatocellular carcinoma.2006

    • Author(s)
      Yokoyama, Y.
    • Journal Title

      International Journal of Oncology 28・3

      Pages: 625-631

  • [Journal Article] Analysis on heat stress-induced hyperphosphorylation of stathmin at serine 37 in Jurkat cells by means of two-dimensional gel electrophoresis and tandem mass2006

    • Author(s)
      Nakamura, K.
    • Journal Title

      Journal of Chromatograph A 1106

      Pages: 181-189

  • [Journal Article] Proteomic analysis of macrophages stimulated by LPS. -LPS inhibits the cleavage of nucreophosmin-2006

    • Author(s)
      Zhang, X.
    • Journal Title

      Electrophoresis (in press)

  • [Journal Article] Increased expression and phosphorylation of liver glutamine synthetase in well-defferentiated hepatocellular carcinoma tissues of patients infected with hepatitis C virus.2006

    • Author(s)
      Kuramitsu, Y.
    • Journal Title

      Electrophoresis (in press)

  • [Journal Article] Current progress in proteomic study of hepatitis C virus-related human hepatocellular carcinoma.2005

    • Author(s)
      Kuramitsu, Y.
    • Journal Title

      Expert Review of Proteomics 2・4

      Pages: 589-601

  • [Journal Article] Proteomic profiling ofr cancer progression : Differential display analysis for the expression of intracellular proteins between regressive cancer cell lines.2005

    • Author(s)
      Hayashi, E.
    • Journal Title

      Proteomics 5・4

      Pages: 1024-1032

  • [Journal Article] Overexpression of alpha enolase in hepatitis C virus-related hepatocellular carcinoma : association with tumor progression as determined by proteomic analysis.2005

    • Author(s)
      Takashima, M.
    • Journal Title

      Proteomics 5・6

      Pages: 1686-1692

URL: 

Published: 2007-04-02   Modified: 2016-04-21  

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