2005 Fiscal Year Annual Research Report
転写因子相互作用による口腔がんの悪性形質獲得機構の解析
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17659622
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| Research Institution | Hokkaido University |
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Principal Investigator |
進藤 正信 北海道大学, 大学院・歯学研究科, 教授 (20162802)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
小林 正伸 北海道大学, 遺伝子制御研究所, 助教授 (80241321)
東野 史裕 北海道大学, 大学院・歯学研究科, 助手 (50301891)
戸塚 靖則 北海道大学, 大学院・歯学研究科, 教授 (00109456)
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| Keywords | E1AD / ETS がん遺伝子 / 転写機構 |
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| Research Abstract |
E1AFは我々がクローニングしたetsファミリー転写因子で、これまでにE1AFが口腔扁平上皮がんの50%以上で発現し、細胞外基質分解酵素MMPの転写を亢進することで、がん細胞の浸潤・転移活性と深く関わっていることを明らかにしてきた。
今回、E1AFによる転写調節機構を明らかにするために、まずE1AF自体の転写がどのように行われているのかについて検討を行った。5'-RAC用法を用いてE1AFのプロモーター領域の解析をおこなった。その結果、E1AFのプロモーター領域にTATA boxは認められなかったが、二つのCAAT boxが転写開始部位より80bp上流と310bp上流に認められた。Sp1やestrogen receptorを含む多数の転写因子結合モチーフが存在したが、とくにE1AF/PEA3結合モチーフが9個認められ、このような所見はE1AFの発現がself-regulatingなものである可能性を示唆するものであった。E1AFの発現のみられない293細胞にE1AFプロモーターの全長を組み込んだルシフェラーゼ発現ベクターとE1AF発現ベクターを導入し、ルシフェラーゼアッセイを行ったところ、濃度依存性の発現亢進が認められE1AFによる自身の発現亢進が裏付けられた。
Estrogen receptor結合領域はE1AF/PEA3結合領域の近傍に存在していた。Estrogen receptor alphaおよびbeta発現プラスミドを用いた解析で、estrogen receptorはE1AFの転写を亢進した。全身臓器におけるE1AFの発現を検索したところ、E1AFは下垂体などの内分泌系臓器に限局して発現しており、ホルモンとの相互作用があることを示唆するものであった。
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