アンギオスタチンを介したニックβ2グリコプロテインIの血管新生に与える影響

2005 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 17689031
• Research Institution: Hokkaido University
• Principal Investigator: 保田 晋助 北海道大学, 大学院・医学研究科, 助手 (00374231)
• Keywords: β_2グリコプロティンI / アンギオスタチン / 血管新生

Research Abstract

β_<2->glycoprotein I(β_2-GPI)は様々な生理活性を持つリン脂質結合性糖蛋白であり,C末端に疎水性のループ構造を持つが,プラスミンの作用で疎水性ループが切断され,リン脂質結合活性を失う一方でプラスミンに対する結合能を獲得する(ニックβ_2-GPI).今回我々は,生体内でプラスミノゲンがプロセシングを受けて発生し,血管新生抑制作用を有するangiostatin (AS)とニックβ_2-GPIとの相互作用について検討した.
β_2-GPIをプラスミン処理後にヘパリンカラムおよび抗β_2-GPI抗体カラムを用いてニックβ_2-GPIを調整した.ヒト血漿中に存在するアイソフォームに類似するドメイン1-5を有するASを購入,ニックβ_2-GPIとの結合を検討した.固層化プラスミノゲン対するニックβ_2-GPIの結合はASを液層に加えることによって減弱したことから,両者の相互作用が示唆された.次に,optical biosensorを用いて直接の結合を検討した.キュベットにstreptavidinを介してビオチン化ASを固定し,ニックβ_2-GPIあるいはβ_2-GPIが結合を示すかどうか検討した.その結果,β_2-GPIは全く結合を示さなかったが,ニックβ_2-GPIはK_D=0.3x10^<-6>Mと比較的強固な結合を示した.
ASが血管内皮細胞の遊走を阻害する事を,HUVECが細胞外器質に類似したMatrigel内を遊走するmigration assayを用いて評価した.結果,ASは濃度依存性にHUVECの遊走を阻害することが確認された.この系にインタクトβ_2-GPIあるいはニックβ_2-GPIを加えることで,ニックβ_2-GPIのAS存在下における血管内皮細胞の遊走に及ぼす影響を評価した.ニックβ_2-GPIは,ASによって抑制された遊走能を回復することが示唆されたが,現時点で統計学的有意差は認めていない.

Research Products

• [Journal Article] Protective effect of pravastatin on vascular endothelium in patients with systemic sclerosis; a pilot study・ (2006)
  • Author(s): Furukawa S, Yasuda S, Amengual O, Horita T, Atsumi T, Koike T
  • Journal Title: Annals of Rheumatic Diseases (In press)
• [Journal Article] Urokinase-type plasminogen activator is a preferred substrate of the human epithelium serine protease tryptase ε/PRSS22. (2005)
  • Author(s): Yasuda S, Morokawa N, Wong GW, Rossi A, Madhusudhan MS, Sali A, Askew YS, Adachi R, Silverman GA, Krilis SA, Stevens RL.
  • Journal Title: Blood 105(10) Pages: 3893-3901
• [Journal Article] Butyrate suppresses tumor necrosis factor alpha production by regulating specific messenger RNA degradation mediated through a cis-acting AU-rich element. (2005)
  • Author(s): Fukae J, Amasaki Y, Yamashita Y, Bohgaki T, Yasuda S, Jodo S, Atsumi T, Koike T
  • Journal Title: Arthritis and Rheumatism 52・9 Pages: 2697-2707
• [Journal Article] Research around β_2-glycoprotein I: A major target for antiphospholipid antibodies. (2005)
  • Author(s): Atsumi T, Amengual O, Yasuda S, Masuura E, Koike T
  • Journal Title: Autoimmunity 38・5 Pages: 377-381
• [Journal Article] Antigenic structures recognized by anti-β_2-glycoprotein I auto-antibodies. (2005)
  • Author(s): Kasahara H, Matsuura E, Kaihara K, Yamamoto D, Kobayashi K, Inagaki J, Ichikawa K, Tsutsumi A, Yasuda S, Atsumi T, Yasuda T, Koike T
  • Journal Title: International Immunology 17・12 Pages: 1533-1542
• [Journal Article] Pathogenesis of antiphospholipid antibodies: impairment of fibrinolysis and monocyte activation via the p38 mitogen-activated protein kinase pathway. (2005)
  • Author(s): Yasuda S, Bohgaki M, Atsumi T, Koike T
  • Journal Title: Immunobiology 210・10 Pages: 775-780
• [Book] β_2-glycoprotein I and Anti-β_2-glycoprotein I antibodies In: Khamashta MA, editor. Hughes Syndrome. (2006)
  • Author(s): Yasuda S, Atsumi T, Koike T
  • Total Pages: 307-318
  • Publisher: Springer