2006 Fiscal Year Annual Research Report
DNA二重鎖切断の認識・修復の分子機構に基づく放射線感受性予測・制御の新戦略体系
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17689036
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| Research Institution | Tokyo Institute of Technology |
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Principal Investigator |
松本 義久 東京工業大学, 原子炉工学研究所, 助教授 (20302672)
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| Keywords | DNA二重鎖切断修復 / 放射線感受性 / がん放射線治療 / DNA依存性プロテインキナーゼ / XRCC4 / XLF(Cernunnos) / タンパク質リン酸化 |
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| Research Abstract |
1)前年度までの研究結果から、DNA-PKの重要な制御標的である可能性が極めて濃厚と考えられるXRCC4について、更なる検討を進めた。リン酸化部位欠損変異体の性状および放射線応答解析などから、これらの細胞で実際にDNA二重鎖切断修復能が低下していることが強く示唆された(投稿準備中)。
2)XRCC4およびDNA ligase IVに結合する分子として18年初頭に報告されたXLF(XRCC4-like factor、別名Cernunnos)について、DNA-PKの基質となる可能性を検討した。具体的には、XLF遺伝子全長をクローニング後、Hisタグ融合タンパク質を作製し、私がこれまでの研究過程で精製したDNA-PKを用いて、in vitroリン酸化実験を行った。その結果、XLFがDNA-PKによってリン酸化を受けることが明らかになった。また、in vivoでのリン酸化解析や局在、発現量解析のため、XLFに対するウサギポリクローナル抗体を作製した。
3)前年度までに、XRCC4の損傷クロマチンへの結合を解析する方法を確立した。本年度は、DNA-PKの阻害剤、siRNAなどを用いた解析から、XRCC4の損傷部位への動員にはDNA-PKcsは必要ないことなどが分かった。しかしながら、クロマチン結合状態にあるXRCC4は、リン酸化フォーム(DNA-PKによるものと考えられる)に富んでいることから、リン酸化が損傷部位への動員と連動して(直後に)起こると考えられた(投稿中)。
4)DNA-PK、XRCC4などと放射線感受性の関係について、臨床医(札幌医科大学放射線科、坂田耕一准教授、染谷正則助教ら)との共同研究を行った。リンパ球におけるDNA-PK活性の個人差と癌罹患性との関係を見出し、また、DNA-PKの3つのサブユニットの転写制御機構に関する新たな知見などを得た。
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[Journal Article] Src tyrosine kinase inhibitor PP2 suppresses ERK1/2 activation and epidermal growth factor receptor transactivation by X-irradiation.2006
Author(s)
Li, Z., Hosoi, Y.^*, Cai, K., Tanno, Y., Matsumoto, Y., 他4名
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Journal Title
Biochemical and Biophysical Research Communications 342
Pages: 363-368
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[Journal Article] Heterogeneous expression of DNA-dependent protein kinase in esophageal cancer and normal epithelium.2006
Author(s)
Tonotsuka, N., Hosoi, Y^*, Miyazaki, S., Miyata, G., Sugawara, K., Mori, T., Ouchi, N., Satomi, S., Matsumoto Y., 他3名
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Journal Title
International Journal of Molecular Medicine 18
Pages: 441-447
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