肺癌の胸幹播種・癌性リンパ管症における血管内皮増殖因子の関与とその治療法の解明

2005 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 17790242
• Research Institution: Yokohama City University
• Principal Investigator: 下山田 博明 横浜市立大学, 医学部, 助手 (60381472)
• Keywords: 肺癌 / 胸膜播種 / 癌性リンパ管症 / 血管内皮増殖因子

Research Abstract

1.ヒトVEGF-A、VEGF-C、VEGF-D発現ベクターの作成及び培養肺癌細胞への遺伝子導入
RT-PCR法により全長のVEGF-A、VEGF-C、VEGF-D cDNAを得て、発現ベクターpZeoSV2、pcDNAhygro、pcDNAneoに挿入し、ヒトVEGF-A、VEGF-C、VEGF-Dの発現ベクターを作成する。これらを肺癌培養細胞株に遺伝子導入し、以下のtransfectantを得ることに成功している。pZeoSV2-VEGF-A transfected cell、pZeoSV2-VEGF-C transfected cell、pcDNAhygro-VEGF-C transfbcted cell、pcDNAneo-VEGF-C transfected cell、pcDNAneo-VEGF-D transfected cell、pZeoSV2-VEGF-D transfected cell、pZeoSV2-VEGF-A/pcDNAneo-VEGF-C double transfected cell、pZeoSV2-VEGF-A/pcDNAneo-VEGF-D double transfected cell、pcDNAhygro-VEGF-C/pcDNAneo-VEGF-D double transfected cell。これらの細胞株を継代し、cell lysate中のVEGFの発現を調べ、stable transfectantであることを確認した。
2.ヌードマウスへのVEGF-family遺伝子導入肺癌細胞の移植:
上記のごとく作成したVEGF-family導入肺癌培養細胞株間における腫瘍形成能、胸水形成能、胸膜播種形成能、肺の癌性リンパ管症の状態等を評価するため、一定数の各培養細胞株をヌードマウスの尾静脈に注入した。現在、注入したヌードマウスの状態に注意しながら経過観察中である。