血管新生抑制因子の制御を応用した新しい細胞治療の開発

2005 Fiscal Year Annual Research Report

• Project/Area Number: 17790510
• Research Institution: Kurume University
• Principal Investigator: 竹下 吉明 久留米大学, 医学部, 助手 (50360285)
• Keywords: 循環器・高血圧 / 再生医学

Research Abstract

近年、四肢の末梢動脈虚血性疾患や虚血性心疾患などに対し、従来の薬物治療、経皮的血管形成術、バイパス手術等に加え、自己骨髄細胞やVEGFなどの血管新生促進因子を用いた血管新生治療が開発された。しかしながら十分な効果が認められない症例が少なからず存在する。ところで主に血管新生治療は血管新生促進因子の補充によるものであるが、生体内には多数の血管新生抑制因子が存在している。しかしながら虚血性血管新生における血管新生抑制因子の役割については現在のところ解明されていない。そこで我々は、血管新生抑制因子の中でも最も抑制作用の強いとされるPEDF (Pigment epithelium-derived factor)の虚血組織における動態の観察(実験1)、抗PEDF抗体のPEDF中和能の確認(実験2)を行い、片側下肢虚血モデルをマウスに作成後抗PEDF抗体を投与し血流の回復を観察した(実験3)。
[実験1]マウスに片側下肢虚血モデルを作成し、PEDF mRNAをRT-PCR法を用いて経時的に観察した。虚血モデル作成前と比較し1週間後以降に、PEDF mRNAが強く発現していることを確認した。
[実験2]MG63(骨肉腫細胞)の自然増殖能はPEDFにより抑制されるが、これが抗PEDF抗体の併用投与により中和されることを細胞培養で確認した。
[実験3]マウスに片側下肢虚血モデルを作成し、非投与群(自然経過)、抗PEDF抗体投与群に分け、Laser Doppler Blood flowを用いて虚血肢の血流回復を観察した。抗体投与群は比投与群と比較し、血流回復が良好であることを確認した。
現在以上の経過であるが、今後は血管新生促進因子(VEGF)と併用投与した場合の観察や組織学的検討を行う予定である。