2017 Fiscal Year Annual Research Report
全ゲノム機能的CRISPRスクリーニングによる新規白血病治療標的分子の探索
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17H01567
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| Research Institution | Kyushu University |
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Principal Investigator |
前田 高宏 九州大学, 大学病院, 准教授 (00791972)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
山内 拓司 九州大学, 医学研究院, 特別研究員(PD) (20796213)
菊繁 吉謙 九州大学, 大学病院, 助教 (40619706)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| Keywords | 分化誘導療法 / プレmRNAプロセッシング / 急性骨髄性白血病 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
平成29年度には、CRISPR/Cas9スクリーニングで同定したDCPS遺伝子の、白血病細胞分化・細胞死及ぼす影響をin vitro、in vivoで検討し、その作用分子メカニズムを解明した。さらに、DCPS阻害剤(RG3039)の抗白血病効果を、白血病細胞株、PDXマウスヒト白血病モデルを用いて検証した。これらの研究から、DCPSの阻害が白血病細胞中でmRNAのミススプライシングを誘導することで、細胞内にウイルス感染様の反応を惹起し、白血病細胞の分化・細胞死を誘導することが判明した。DCPS遺伝子の欠損が、ヒトの造血に及ぼす影響を探るため、DCPS遺伝子のホモ欠損を有する家系のCBCを解析し、DCPS遺伝子が白血病細胞の生存に必要である一方で、正常造血には不必要であることを見いだした。これらの結果はCancer Cell誌に今年発表した (Yamauchi et al. Cancer Cell, 2018)。PAICS阻害剤の抗白血病細胞効果に関しては、現在in vitro, in vivoでの抗白血病効果を確認しており、その作用分子メカニズムと阻害剤に対する耐性のメカニズムをCRISPR-Cas9全ゲノムスクリーニングを薬剤存在下で行うことにより、解明を試みている。今回のスクリーニングで同定した130の白血病遺伝子それぞれに対して、Saturation mutagenesiを試行し、機能的に重要なアミノ酸残基の同定を試みている。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
2: Research has progressed on the whole more than it was originally planned.
Reason
DCPSに関するプロジェクトは、論文化にいたっており、その他のプロジェクトに関しても、当初の予定通り進行している。
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| Strategy for Future Research Activity |
CRISPR-Cas9スクリーニングで同定した他の標的分子に関して、CRISPR-saturation mutagenesis等を駆使してさらなる解析をすすめ、阻害剤に関してはその抗白血病効果をin vitro, in vivoで評価する。
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[Journal Article] Genome-wide CRISPR-Cas9 Screen Identifies Leukemia-Specific Dependence on a Pre-mRNA Metabolic Pathway Regulated by DCPS2018
Author(s)
Yamauchi T, Masuda T, Canver MC, Seiler M, Semba Y, Shboul M, Al-Raqad M, Maeda M, Schoonenberg V, Cole MA, Macias-Trevino C, Ishikawa Y, Yao Q, Nakano M, Arai F, Orkin S, Reversade B, Buonamici S, Pinello L, Akashi K, Bauer DE, Maeda T
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Journal Title
Cancer Cell
Volume: 33
Pages: 386～400.e5
DOI
Peer Reviewed / Int'l Joint Research
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